ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5
ГЛАВА 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 12
1.1 Современные подходы в терапии злокачественных новообразований. . 12
1.1.1 Физические основы бор-нейтронозахватной терапии. . . . . . . . . . . . . . . 15
1.1.2 Проблемы и перспективы метода. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 16
1.2 Литий. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 19
1.2.1 Биологические характеристики солей лития и применение в
медицине. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
19
1.2.2 Механизмы проникновения лития в клетку и его токсичность. . . . . . . 20
1.2.3 Физические основы использования лития в нейтронозахватной
терапии. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
22
1.3 Морфология почки. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 26
1.4 Острое повреждение почек. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 33
1.5 Белки-маркеры острого повреждения почек. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37
1.6 Заключение по литературному обзору. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 40
ГЛАВА 2 МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 41
2.1 Реагенты. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 41
2.2.1 Клеточные культуры. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 42
2.2.2 Колориметрический тест для оценки метаболической активности
клеток. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
42
2.2.3 Клоногенный анализ. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 43
2.2.4 Атомно-эмиссионная спектрометрия с индуктивно-связанной
плазмой. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
44
2.3 Эксперимент in vivo. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 45
2.3.1 Анализ биораспределения лития. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 46
2.3.2 Световая микроскопия . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 47
2.3.3 ШИК-реакция. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 47
2.3.4 Трансмиссионная электронная микроскопия . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 48
2.3.5 Иммуногистохимия. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 48
3
2.3.6 Морфометрия и статистический анализ. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 49
ГЛАВА 3 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 51
3.1 Результаты экспериментальных работ in vitro. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 51
3.1.1 Оценка цитотоксичности препаратов бора на клетках меланомы. . . . . 51
3.1.2 Анализ накопления бора в клетках меланомы. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 53
3.1.3 Оценка цитотоксичности солей лития на клетках меланомы. . . . . . . . . 54
3.1.4 Анализ накопления лития в клетках меланомы. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 57
3.2 Результаты экспериментальных работ in vivo. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 58
3.2.1 Изучение биораспределения лития в опухоли, коже, крови, почках,
головном мозге. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
58
3.2.2 Анализ изменения веса животных после введения лития карбоната
для определения острой токсичности. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
61
3.2.3 Оценка структурных изменений почки при введении лития карбоната 61
3.2.4 Анализ повреждения почек при введении лития карбоната c учетом
данных ШИК-реакции. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
68
3.2.5 Ультраструктурная организация фильтрационного барьера и
проксимального отдела почки. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
69
3.2.6 Оценка экспрессии белков-маркеров острого повреждения почек
Kim-1 и NGAL. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
84
ГЛАВА 4 ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ. . . . . . . . . . 89
4.1 Сравнительная оценка цитотоксичности и накопления бора и лития
in vitro. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . .
89
4.2. Биораспределение лития in vivo. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 93
4.3. Токсичность лития. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 97
ВЫВОДЫ. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 103
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 102
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 105
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 107
СПИСОК ИЛЛЮСТРАТИВНОГО МАТЕРИАЛА. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 140
