ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ……………………………………………………………………………..5
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ…………………………………………………....13
1.1 Острый лимфобластный лейкоз (ОЛЛ) у детей………………………………13
1.1.1 Эпидемиология ОЛЛ у детей……………………………………………..13
1.1.2 Современное представление о причинах развития ОЛЛ………………..13
1.1.3 Подходы к терапии ОЛЛ у детей…………………………………………15
1.2 CD19-направленная иммунотерапия в лечении В-линейного ОЛЛ…………16
1.2.1 Виды иммунотерапии, мишени для воздействия на клетках В-линейного
ОЛЛ………………………………………………………………………...16
1.2.2 Блинатумомаб: механизм действия, применение……………………….17
1.2.3 CD19 CAR-T клетки: виды, механизм действия, применение………….21
1.2.4 Механизмы
резистентности
клеток
В-линейного
ОЛЛ
к
иммунотерапии……………………………………………………………24
1.3 Минимальная остаточная болезнь (МОБ) при В-линейном ОЛЛ……………26
1.3.1 МОБ как критерий ответа на терапию, современные методы
мониторинга при ОЛЛ …………………………………………………....26
1.3.2 Принцип метода проточной цитометрии………………………………...28
1.3.3 Основные подходы к определению МОБ при В-линейном ОЛЛ после
стандартной химиотерапии………………………………………………30
1.3.4 Особенности мониторинга МОБ при В-линейном ОЛЛ после таргетной
терапии…………………………………………………………………….32
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ………………………………………………37
2.1 Пациенты и образцы, включенные в исследование…………………………...37
2.2 Методы исследования…………………………………………………………..40
2.2.1 Иммунофенотипирование методом проточной цитометрии……………40
2.2.2 Проточная сортировка клеток……………………………………………..43
2.2.3 Определение химеризма в сортированных клетках……………………...44
2.2.4 Определение химерного гена и химерного транскрипта в сортированных
клетках ..…………………………………………………………………...44
3
2.2.5 Определение спектра перестроек генов цепей иммуноглобулинов в
сортированных клетках…….……………………………………………..45
2.2.6 Определение химерного транскрипта в цельном костном мозге………..46
2.2.7 Определение перестроек генов иммуноглобулинов и Т-клеточных
рецепторов в цельном костном мозге……….………..………………….47
2.2.8 Статистический анализ данных…………………………………………...48
ГЛАВА 3. ИММУНОФЕНОТИПИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ОПУХОЛЕВЫХ И
НОРМАЛЬНЫХ В-ЛИНЕЙНЫХ БЛАСТОВ В УСЛОВИЯХ ПРИМЕНЕНИЯ
CD19-НАПРАВЛЕННОЙ ИММУНОТЕРАПИИ…………………………………...51
3.1 Изменение экспрессии CD19 на клетках В-линейного ОЛЛ под действием
CD19-направленной иммунотерапии…………………………………………51
3.2 Экспрессия альтернативных В-линейных маркеров на клетках В-линейного
ОЛЛ……………………………………………………………………………...57
3.3 Ранние CD19-негативные В-клеточные предшественники: особенности
иммунофенотипа, выявление при определении МОБ………………………..61
3.4 Изменение экспрессии антигенов, используемых для определения МОБ, на
лейкемических
клетках
под
действием
CD19-направленной
иммунотерапии…………………………………………………………………72
3.5 Смена линейной принадлежности опухолевых клеток при В-линейном ОЛЛ
под действием CD19-направленной иммунотерапии………………………...77
ГЛАВА 4. ФОРМИРОВАНИЕ И АПРОБАЦИЯ МЕТОДИКИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ
МОБ МЕТОДОМ ПРОТОЧНОЙ ЦИТОМЕТРИИ ПРИ В-ЛИНЕЙНОМ ОЛЛ
ПОСЛЕ CD19-НАПРАВЛЕННОЙ ИММУНОТЕРАПИИ………………………….86
4.1 Методика определения МОБ при В-линейном ОЛЛ в условиях проведения
CD19-направленной иммунотерапии…………………………………………86
4.2 Оценка диагностической эффективности методики определения МОБ……94
ГЛАВА 5. ЗАКЛЮЧЕНИЕ……………………………………………………………98
5.1 Итоги выполнения диссертационного исследования………………………...98
5.2 Перспективы дальнейшего развития темы диссертации……………………100
ВЫВОДЫ…………………………………………………………………………….101
4
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ…………………………………………….102
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ………………………………………………………….103
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ…………………………………………………………...105
