Введение
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 9
1.1. Интродукция картофеля в Европу и Россию
1.1.1. Интродукция картофеля в Европу. 10
1.1.2. Интродукция картофеля в Россию 14
1.2. Систематика картофеля 16
1.3. Основные заболевания картофеля 23
1.3.1. Рак картофеля 23
1.3.2. Вирус скручивания листьев (вирус PLRV) 24
1.3.3. Фитофтороз картофеля 25
1.3.3.1. Симптомы болезни и биология возбудителя 26
1.3.3.2. Распространение и вредоносность фитофтороза 28
1.4. Метод контроля качества. Сортовая идентификация 33
1.5. Молекулярные маркеры в генетическом анализе растений 43
1.5.1. Полиморфизм длины рестриктазных фрагментов (RFLP-маркеры) 43
1.5.2. Произвольно амплифицированная полиморфная ДНК (RAPD-маркеры) 44
1.5.3. Полиморфизм длины амплифицированных фрагментов (AFLP-маркеры) 47
1.5.4. Микросателлитные маркеры 49
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 60
2.1. Реактивы и материалы 60
2.2. Приборы и методы 61
2.3. Общие методики 62
2.3.1. Выращивание растительных образцов 62
2.3.2. Выделение геномной растительной ДНК на силикагелевом сорбенте 62
2.3.3. Выделение геномной растительной ДНК 63
2.3.4. Выделение плазмидной ДНК 66
2.3.5. Полимеразная цепная реакция 67
2.3.6. Электрофорез в агарозном геле 68
2.3.7. Электрофорез в полиакриламидном геле 68
2.3.8. Визуализация ДНК в полиакриламидном геле с помощью нитрата серебра 68
2.3.9. Секвенирование ДНК-матриц по Сэнгеру 69
2.3.10. Приготовление стандартов длины 70
2.3.11. Проведение ферментативных реакций 70
2.3.12. Клонирование амплифицированных фрагментов ДНК 70
2.3.13. Трансформация клеток coli 71
2.3.14. Анализ клонов с помощью ПЦР-амплификации 71
2.3.15. Анализ флуоресцентно-меченных ПЦР-фрагментов 72
2.3.16. Выравнивание нуклеотидных последовательностей 72
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ 73
3.1. Исследование межвидовой вариабельности представителей рода Solanum методом микросателлитного анализа 77
3.1.1. Выбор праймеров для анализа полиморфизма микросателлитных локусов картофеля и его дикорастущих сородичей 77
3.1.2. Исследование выбранных микросателлитных локусов на представителях рода Solanum 80
3.1.3. Оценка генетического полиморфизма видов Solanum 83
3.2. Исследование внутривидовой вариабельности представителей рода Solanum методом микросателлитного анализа 93
3.3. Исследование полиморфизма генома картофеля методом микросателлитного анализа 100
3.4. Контроль интрогрессии генетического материала от родительских форм в
гибриды 124
ЗАКЛЮЧЕНИЕ 135
ВЫВОДЫ 136
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 138
