Введение
Глава 1. Обзор литературы 15
1.1 Фундаментальные и клинические предпосылки трансплантации ретинального пигментного эпителия 15
1.2 История развития трансплантации ретинального пигментного эпителия 20
1.3 3D клеточные сфероиды как форма трансплантата ретинального пигментного эпителия 28
Глава 2. Материалы и методы исследования 32
2.1 Дизайн исследования и общий расход материалов. 32
2.2 Методы культивирования и исследования ретинального пигментного эпителия in vitro 40
2.2.1 Выделение кроличьего ретинального пигментного эпителия, особенности культивирования .40
2.2.2 Иммуноцитохимическое исследование 2D культур ретинального пигментного эпителия 47
2.2.3 Подготовка ретинального пигментного эпителия к трансплантации методом трехмерного клеточного культивирования .50
2.2.4 Оценка морфо-функциональных характеристик 3D сфероидов ретинального пигментного эпителия 52
2.2.5 Сканирующая электронная микроскопия 54
2.2.6 Гистологическое исследование 57
2.3 Экспериментально-клинические методы трансплантации и исследования ретинального пигментного эпителия in vivo 58
2.3.1 Хирургическая техника трансплантации ретинального пигментного эпителия .58
2.3.2 Морфо-функциональные методы исследования глазных яблок кроликов 59
2.4 Статистические методы исследования 61
Глава 3. Результаты исследований выделения и культивирования ретинального пигментного эпителия с последующим конструированием 3D клеточных сфероидов для трансплантации 62
3.1 Результаты выделения и первичного 2D культивирования ретинального пигментного эпителия 62
3.2 Результаты иммуноцитохимического исследования 2D культуры ретинального пигментного эпителия 69
3.3 Результаты конструирования и культивирования 3D сфероидов ретинального пигментного эпителия для трансплантации 71
3.4 Результаты исследований морфо-функциональных характеристик 3D сфероидов ретинального пигментного эпителия 75
3.5 Оценка выживаемости и жизнеспособности 3D сфероидов ретинального пигментного эпителия после нормотермического культивирования 79
3.6 Оценка выживаемости и жизнеспособности 3D сфероидов ретинального пигментного эпителия после краткосрочной гипотермической консервации 81
3.6.1 Результаты иммунофлуоресцентного окрашивания 3D сфероидов ретинального пигментного эпителия после пребывания в условиях гипотермии 81
3.6.2 Результаты исследования адгезивных свойств 3D сфероидов ретинального пигментного эпителия и способность к спредингу после пребывания в условиях гипотермии .83
3.7 Результаты сканирующей электронной микроскопии 85
Глава 4. Разработка техники трансплантации ретинального пигментного эпителия в форме 3D клеточных сферороидов 89
4.1 Разработка модифицированной микрохирургической техники трансплантации 3D сфероидов ретинального пигментного эпителия на глазах кроликов 89
4.2 Результаты гистологического исследования 92
Глава 5. Результаты клинических наблюдений и морфо-функциональных исследований в раннем и отдаленном послеоперационных периодах 97
5.1 Клинико-морфологическое обоснование безопасности техники трансплантации 3D сфероидов ретинального пигментного эпителия .97
5.1.1 Результаты биомикроскопии 97
5.1.2 Результаты офтальмоскопии 98
5.1.3 Результаты ультразвукового В-сканирования 99
5.2 Результаты электроретинографии 101
5.3 Результаты оптической когерентной томографии 104
Заключение 110
Выводы .120
Практические рекомендации .122
Список сокращений и терминов 124
Список литературы .126
