Введение
2 Обзор литературы 14
2.1 Краткая характеристика блютанга 14
2.1.1 Историческая справка 14
2.1.2 Экономическое значение 14
2.1.3 Географическое распространение 15
2.1.4 Эпизоотологические особенности 19
2.1.5. Патогенез блютанга 25
2.1.6 Клинические признаки и патологоанатомические изменения..25
2.2 Краткая характеристика возбудителя блютанга 26
2.2.1 Таксономическое положение вируса блютанга 26
2.2.2 Структура вируса 26
2.2.3 Антигенная вариабельность и родство вируса блютанга с другими представителями рода Orbivirus 28
2.2.4 Устойчивость вируса к физико-химическим факторам 28
2.3 Лабораторная диагностика блютанга 29
2.3.1 Выделение вируса 29
2.3.2 Идентификация вируса 33
2.3.3 Типирование вируса блютанга 34
2.3.4 Выявление специфических антител к вирусу блютанга 34
2.3.5 Молекулярно-биологические методы - выявление РНК вируса блютанга 37
2.3.6 Статистические диагностические показатели методов 38
2.5 Заключение по обзору литературы 40
3 Собственные исследования 42
3.1 Материалы 42
3.1.1 Вирусы 42
3.1.2 Сыворотки 42
3.1.3 Животные 42
3.1.4 Культуры клеток 43
3.1.5 Питательные среды, сыворотки и растворы 43
3.1.6 Реактивы и препараты 43
3.1.7 Диагностические препараты, наборы, тест-системы 44
3.1.8 Оборудование и расходные материалы 44
3.2 Методы 45
3.2.1 Воспроизведение блютанга на восприимчивых животных 45
3.2.2 Отбор проб крови 46
3.2.3 Получение сыворотки 46
3.2.4 Отбор проб органов 46
3.2.5 Подсчет количества лейкоцитов в крови 47
3.2.6 Определение инфекционной активности вируса в культуре клеток 47
3.2.7 Определение инфекционной активности вируса на куриных эмбрионах 47
3.2.8 Определение вируснейтрализующих антител к вирусу блютанга 48
3.2.9 Определение специфических антител к вирусу блютанга реакцией длительного связывания комплемента (РДСК) 48
3.2.10 Определение специфических анти-УР7 антител к вирусу блютанга конкурентным ТФ ИФА 48
3.2.11 Выделение вируса блютанга 49
3.2.12 Идентификация изолята вируса реакцией прямой иммунофлюоресценции (РПИФ) 52
3.2.13 Типирование выделенного вируса блютанга реакцией нейтрализации (РН) с типоспецифическими сыворотками 54
3.2.14 Определение стерильности 54
3.2.15 Статистические методы анализа результатов 55
3.3 Результаты собственных исследований 56
3.3.1 Сравнительная оценка эффективности методов выделения вируса блютанга 56
3.3.2 Выделение вируса блютанга от импортированного в Россию крупного рогатого скота и полученных от них телят 71
3.3.3 Характеристика изолятов вируса блютанга 78
3.3.4 Патогенность выделенного вируса для крупного рогатого скота и овец 83
3.3.5 Иммунный ответ у зараженных вирусом блютанга телят и овец 101
3.3.6 Сравнительная оценка эффективности основных серологических методов диагностики блютанга 108
4 Обсуждение результатов исследований 116
5 Выводы 123
6 Практические предложения 124
7 Список использованной литературы 125
Приложения 150
