Введение
Глава 2. Обзор литературы 12
2.1. Этиология шизофрении 12
2.1.1. Генетика шизофрении 12
2.1.2. Патогенные факторы окружающей среды 15
2.2. Теории шизофрении 18
2.2.1. Дофаминовая теория 18
2.2.2. Глутаматная теория 22
2.2.3. Теория дисбаланса возбудительных и тормозных нейронов 25
2.2.4. Теория нейроразвития 27
2.3. DISC1 (Disrupted-in-Schizophrenia-1) 31
2.3.1. Взаимосвязь гена DISC1 с психическими заболеваниями 31
2.3.2. Функции DISC1 протеина и его интерактома 33
2.3.2.а. Внутриклеточные функции 34
2.3.2.б. Сигнальные пути и синаптическая пластичность 36
2.3.2.в. Нейроразвитие 38
2.4. Экспериментальные исследования шизофрении на моделях животных 40
2.4.1. Основные критерии модели шизофрении 40
2.4.2. Нейробиологические эндофенотипы шизофреноподобного поведения 40
2.4.3. Экспериментальные модели шизофрении 45
2.5. Биомаркеры шизофрении и молекулярные мишени для создания антипсихотиков 53
Заключение к Главе 2 58
Глава 3. Материалы и методы исследования 60
3.1. Экспериментальные животные 60
3.2. Поведенческие тесты 61
3.2.1. Эмоциональное поведение 61
3.2.2. Социальное поведение 62
3.2.3. Когнитивное поведение 63
3.3. Биохимические методы 66
3.3.1. Вестерн блоттинг 66
3.3.2. Коиммунопреципитация 67
3.3.3. Высокоэффективная жидкостная хроматография 68
3.3.4. Определение плотности высокочувствительных дофаминовых рецепторов 2го типа - D2high 68
3.3.5. Определение цитокинов иммуноферментным анализом ELISA 69
3.3.6. Анализ экспрессии генов с помощью микрочипов 70
3.4. Микродиализ in vivo 71
3.5. Иммуногистохимия 72
3.6. Фармакологические препараты 73
3.7. Статистическая обработка 74
Глава 4. Фенотипирование DISC1 мутантных мышей 75
4.1. Создание двух генетических линий мышей с мутациями во 2м экзоне гена DISC1 75
4.2. Сравнительный анализ поведенческих эндофенотипов 31L/31L и 100P/100P мутантных мышей 76
4.3. Фармакологические эффекты антидепрессантов и антипсихотиков на поведение 31L/31L и 100P/100P линий мышей 82
Заключение к Главе 4 85
Глава 5. Биохимические особенности головного мозга мышей линии 100P/100P 86
5.1. Повышенная фармакологическая чувствительность 100P/100P линии к амфетамину 86
5.2. Содержание моноаминов в отделах головного мозга 87
5.3. Уровень межклеточного дофамина в стриатуме в ответ на амфетамин (0.5 мг/кг) 88
5.4. Плотность дофаминовых рецепторов D2high в стриатуме 89
5.5. Эффекты галоперидола (0.8 мг/кг) на гиперактивность, вызванной амфетамином 90
5.6. Взаимодействия между DISC1-L100P протеина с PDE4B, GSK-3 и D2 рецепторами 91
5.7. Эффекты фармакологического и генетического ингибирования GSK-3 на дефицит престимульного торможения у 100Р/100Р мышей 94
5.8. Эффекты коррекции усиленных взаимодействий между DISC1 и D2 рецепторами с помощью TAT-D2R пептида на шизофреноподобное поведение 100Р/100Р мышей 100
Заключение к Главе 5 102
Глава 6. Патогенное взаимодействие 100P/+ мутации с материнской иммунной активацией (МИА): ген х среда гибридная модель шизофрении 102
6.1. Проявление шизофреноподобного поведения у 100P/+ х МИА мышей 103
6.2. Уровень интерлейкина-6 в головном мозге эмбрионов 100P/+ х МИА мышей 106
6.3. Превентивный эффект антител к интерлейкину-6 на проявление шизофреноподобных эндофенотипов у 100P/+ х МИА мышей 106
Заключение к Главе 6 108
Глава 7. Поиск и валидация новых мишеней для создания превентивной терапии: молекулярно-клеточный анализ эффектов вальпроата на шизофренноподобные эндофенотипы 100P/100P мышей 109
7.1. Проявление шизофреноподобных эндофенотипов у 100P/100P мышей в возрасте 16 недель, но не 8 недель 109
7.2. Превентивная эффективность вальпроата на шизофреноподобные эндофенотипы 100P/100Pмышей 111
7.3. Эффекты DISC1-L100P мутации, вальпроата и их взаимодействия на уровень экспрессии генов в структурах головного мозга и идентификация липокалина-2 (Lcn2) как гена-кандидата для ранней диагностики и создания превентивной терапии 114
7.4. Повышенное количество глиальных клеток в области рострального миграционного тракта у 100Р/100Р мышей 117
7.5. Взаимосвязь между экспрессией Lcn2, количеством глиальных клеток в области рострального миграционного тракта и проявлением шизофреноподобных эндофенотипов у 100Р/100Р мышей 120
Заключение к Главе 7 127
Глава 8. Обсуждение результатов 125
8.1. Генетическая линия мышей 100P/100Р как модель шизофрении 125
8.2. Вклад DISC1-L100P интерактома в дофаминергическую теорию шизофрении 130
8.3. Вклад DISC1-L100P мутации в теорию нейроразвития шизофрении 136
8.4. Вклад DISC1-L100P интерактома в разработку биомаркеров шизофрении и создание антипсихотиков нового поколения 140
Заключение 146
Выводы 148
Список литературы 149
Список использованных сокращений 201
Приложение 1 204
