Введение
Глава 1. Биологические функции и метаболизм биологически активных соединений природного происхождения 15
1.1. Полифенолы 15
1.1.1. Общая характеристика полифенолов 15
1.1.2. Классификация полифенолов 17
1.2. Фитоэкдистероиды 19
1.2.1. Общая характеристика фитоэкдистероидов 19
1.2.2. Классификация экдистероидов 21
1.3. Антиоксидантные и прооксидантные свойства полифенолов и экдистероидов 23
1.3.1. Механизмы антиоксидантной активности полифенолов и фитоэкдистероидов 23
1.3.1.1. Радикал-связывающая активность (РСА) 24
1.3.1.2. Металл-хелатирующая способность полифенолов и экдистероидов 25
1.3.1.3. Взаимодействие полифенолов и экдистероидов с клеточными мембранами 26
1.3.1.4. Действие полифенолов и экдистероидов на антиоксидантные системы клетки 27
1.3.2. Прооксидантные и токсические свойства полифенолов и экдистероидов 28
1.3.3. Методы оценки антиоксидантной активности полифенолов и экдистероидов 29
1.4. Биодоступность и влияние полифенолов и экдистероидов на живые организмы 31
1.4.1. Биодоступность полифенолов 31
1.4.2. Биодоступность фитоэкдистероидов 32
1.4.3. Терапевтические эффекты полифенолов и экдистероидов 33
1.4.4. Влияние полифенолов и экдистероидов на жизнедеятельность бактерий 34
Глава 2. Стрессовые регулоны Escherichia coli 37
2.1. Адаптация E. coli к окислительному стрессу 37
2.1.1. Активные формы кислорода 37
2.1.2. Повреждения, вызываемые АФК 39
2.1.3. Механизмы защиты от окислительного стресса 40
2.1.4. Адаптивный ответ на окислительный стресс 42
2.2. Общий стрессовый ответ 44
2.3. SOS-ответ 46
Глава 3. Механизмы действия антибиотиков 49
3.1. Ингибиторы синтеза клеточной стенки 50
3.2. Ингибиторы синтеза белка 50
3.3. Ингибиторы репликации и транскрипции 52
3.4. Оксидантный механизм бактерицидного действия антибиотиков и программируемая клеточная смерть 53
Экспериментальная часть 58
Глава 4. Объекты и методы исследования 58
4.1. Объекты исследования 58
4.2. Питательные среды и условия культивирования 58
4.3. Определение удельной скорости роста 59
4.4. Определение влияния экстрактов на чувствительность E. coli к H2O2 и антибиотикам 59
4.5. Минимальная ингибирующая концентрация (МИК) антибиотиков 60
4.6. Колониеобразующая способность 60
4.7. Определение активности -галактозидазы 61
4.8. Получение экстрактов растений 62
4.9. Общее содержание полифенолов в экстрактах 62
4.10.Содержание отдельных полифенолов и экдистероидов в экстрактах 63
4.11.Определение хелатирующей активности 63
4.12.Определение радикалсвязывающей активности (РСА) 64
4.13.Измерение скорости продукции H2О2 препаратами 64
4.14.Измерение парциального давления кислорода 65
4.15.Измерение ионов K+ 65
4.16.Выявление изменений мембранного потенциала 65
4.17.Статистическая обработка результатов 66
4.18.Материалы 66
Глава 5. Антиоксидантные свойства биологически активных субстанций, содержащих полифенолы и экдистероиды, и их влияние на активность стрессовых регулонов Escherichia coli 67
5.1. Изучение свойств исследуемых препаратов с использованием химических тестов 68
5.1.1. Содержание полифенолов и экдистероидов в исследуемых препаратах 68
5.1.2. Изучение радикал-связывающей, хелатирующей и прооксидантной активности исследуемых препаратов 71
5.2. Изучение влияния исследуемых препаратов на растущие культуры бактерий E. coli 74
5.2.1. Влияние исследуемых препаратов на удельную скорость роста 74
5.2.2. Влияние исследуемых препаратов на экспрессию стрессовых регулонов 78
5.2.3. Антиоксидантное действие исследуемых препаратов на клетки E. coli при пероксидном стрессе 85
Глава 6. Влияние биологически активных субстанций, содержащих полифенолы и экдистероиды, на толерантность E. coli к различным антибиотикам 88
6.1. Изучение влияния исследуемых препаратов на чувствительность E. coli к действию антибиотиков разных классов 88
6.1.1. Изучение влияния исследуемых препаратов на чувствительность E. coli к ципрофлоксацину 88
6.1.2. Изучение влияния исследуемых препаратов на чувствительность E. coli к канамицину 94
6.1.3. Изучение влияния исследуемых препаратов на чувствительность E. coli к стрептомицину 99
6.1.4. Влияние исследуемых препаратов на чувствительность E. coli к цефотаксиму 103
6.2. Влияние исследуемых препаратов на экспрессию стрессовых регулонов при действии ципрофлоксацина 107
Обсуждение 116
Заключение 132
Выводы 133
Литература 135
