Введение
CLASS Глава I Обзор литературы 1 CLASS 2
1.1. Введение 12
1.2. Строение ЛЬ+/&Ґ"АТФазьі 15
1.2.1. Общее строение Na77ҐАТФазы 18
1.2.2. а - субъединица 21
1.2.3. р - субъединица 25
1.2.4. Семейство FXYD белков (у-субъединица) 27
1.2.5. Анкирины 28
1.3. Работа Na/іСКїФгзьі 29
1.4. Влияние напряжения кислорода на синтез АТФ 33
1.5. Значение уровня свободных радикалов для клетки 35
1.6. Активность миелопероксидазы (МП) в сердце при ишемии 43
1.7. Предполагаемые механизмы регуляции Лга+/ЛГ+АТФазы
в условиях разного напряжения кислорода 44
Глава II Материалы и методы исследований 46
2.1. Объект исследований 46
2.2. Используемые растворы и реактивы 47
2.3. Метод изоляции сердца 50
2.4. Метод перфузии изолированного сердца по Лангендорффу 51
2.4.1. Протоколы проведения перфузии сердца 55
2.5. Приготовление проб к анализу. Гомогенизация 57
2.5.1. Подготовка проб для измерения гидролитической ктивности Ла+/АГ,"АТФазы 58
2.5.2. Подготовка проб для проведения измерения АТФ и GSH/GSSH 58
2.5.3. Подготовка проб для измерения пероксидаз 59
2.6. Измерение гидролитической активности Лйг+Ж"ьАТФазы 59
2.7. Измерение АТФ в гомогенате перфузированного сердца 66
2.8. Измерение GSH/GSSG в гомогенате перфузированного сердца 68
2.9. Измерение пероксидаз в гомогенате перфузированного сердца 72
2.10. Определение белка 75
2.11. Измерение количества воды в пробе сердца 76
2.12. Методы обработки результатов экспериментов 77
Глава III Результаты и обсуждения 78
3.1. Изменения гидролитической активности в зависимости от времени перфузии и напряжения кислорода в перфузионном растворе 77
3.1.1. Кислород зависимые изменения гидролитической активности Na*/К* АТФ азы 77
3.1.2. Зависимость гидролитической активности фазы от напряжения кислорода в перфузионном растворе за 15 минут
перфузии 82
3.2. Изменения концентрации АТФ в гомогенате желудочков сердца при перфузии сердца в разных условиях 84
3.2.1. Кинетические изменения концентрации АТФ в гомогенате желудочков сердца 84
3.2.2. Зависимость концентрации АТФ в гомогенате желудочков сердца от напряжения кислорода в перфузионном растворе за 15
минут перфузии 91
3.3. Изменения окисленной и восстановленной форм глутатиона в гомогенате желудочков сердца 94
3.3.1. Кинетические изменения окисленной и восстановленной
форм глутатиона в гомогенате желудочков сердца 94
3.3.2. Зависимость уровня окисленной и восстановленной форм
глутатиона в гомогенате желудочков сердца от напряжения
кислорода в перфузионном растворе за 15 минут 102
3.4. Кислород зависимые изменения уровня пероксидаз в гомогенате желудочков сердца желудочков сердца 106
3.4.1. Кинетические изменения уровня пероксидаз в гомогенате желудочков сердца 106
3.4.2. Зависимость уровня пероксидаз в гомогенате желудочков сердца от напряжения кислорода в перфузионном растворе за 15
минут 109
3.5. Кинетические изменения количества воды в ткани желудочков сердца 111
3.6. Заключение 116
3.7. Выводы 119
Список цитируемой литературы 122
Благодарности 140
