Введение
ГЛАВА 1. Обзор литературы 11
1.1. Взаимодействие моноцитов крови с эндотелиальными клетками сосудов 11
1.1.1. Морфологические характеристики взаимодействующих клеток 11
1.1.2. Этапы мобилизации моноцитов из кровяного русла в очаг инфекции 13
1.1.3. Секреторная активность моноцитов крови человека 22
1.2. Влияние Streptococcus pyogenes и его компонентов на процессы мобилизации моноцитов в очаг воспаления 29
1.2.1. Факторы патогенности (вирулентности) гноеродного стрептококка 29
1.2.2. Влияние бактериальных компонентов на функции моноцитов крови 32
1.2.3. Влияние бактериальных компонентов на функции эндотелиальных клеток 34
1.3. Влияние компонентов гноеродного стрептококка на регуляцию взаимодействия
моноцитов крови с эндотелиальными клетками сосудов 37
ГЛАВА 2. Материалы и методы 40
2.1. Культуры клеток 40
2.2. Выделение мононуклеарных лейкоцитов из периферической крови доноров
2.4. Характеристика супернатанта разрушенных 5. pyogenes 43
2.5. Оценка интенсивности апоптоза и некроза в исследуемых культурах 44
2.6. Оценка адгезионной активности моноцитов крови человека и клеток линии ТНР-1..
2.6.1. Оценка адгезионной активности клеток линии ТНР-1 к монослою эндотелиальных клеток 46
2.6.2. Оценка адгезионной активности моноцитов крови к монослою эндотелиальных клеток 47
2.6.3. Оценка адгезионной активности мононуклеарных лейкоцитов крови к пластику 48
2.7. Оценка миграционной активности моноцитов крови и клеток линии ТНР-1 48
2.7.1. Оценка миграционной активности клеток линии ТНР-1 50
2.7.2. Оценка миграционной активности моноцитов крови человека
2.8. Исследование уровней экспрессии адгезионных молекул 52
2.9. Количественная оценка цитокинов в супернатантах 52
2.10. Исследование уровней экспрессии фосфокиназ
2.11. Статистическая обработка результатов 54
ГЛАВА 3. Результаты 55
3.1. Влияние супернатанта разрушенных стрептококков на функции клеток линии ТНР-
3.1.1. Влияние супернатанта разрушенных стрептококков на адгезию клеток линии ТНР-1 к монослою эндотелиальных клеток 55
3.1.2. Влияние супернатанта разрушенных стрептококков на трансэндотелиальную миграцию клеток линии ТНР-1 58
3.1.3. Влияние супернатанта разрушенных стрептококков на миграционную активность клеток линии ТНР-1 59
3.1.4. Влияние супернатанта разрушенных стрептококков на уровень экспрессии адгезионных молекул на клетках линии ТНР-1 60
3.1.5. Влияние супернатанта разрушенных стрептококков на уровень экспрессии фосфо-NFKB в клетках линии ТНР-1 62
3.1.6. Влияние супернатанта разрушенных стрептококков на адгезию клеток линии ТНР-1 (интактных и преинкубированных с токсином коклюша) к эндотелиальным клеткам 63
3.1.7. Влияние супернатанта разрушенных стрептококков на трансэндотелиальную миграцию интактных и преинкубированных с токсином коклюша клеток линии ТНР-1 64
3.1.8. Влияние супернатанта разрушенных стрептококков на интенсивность миграции интактных и преинкубированных с токсином коклюша клеток линии ТНР-1 66
3.2. Влияние супернатанта разрушенных стрептококков на функции моноцитов периферической крови человека 67
3.2.1. Влияние супернатанта разрушенных стрептококков на адгезию моноцитов крови человека к монослою эндотелиальных клеток 67
3.2.2. Влияние супернатанта разрушенных стрептококков на адгезию мононуклеарных лейкоцитов крови человека к пластику 69
3.2.3. Влияние супернатанта разрушенных стрептококков на трансэндотелиальную миграцию моноцитов крови человека 71
3.2.4. Влияние супернатанта разрушенных стрептококков на миграцию моноцитов крови человека 72
3.2.5. Влияние супернатанта разрушенных стрептококков на миграцию интактных и преинкубированных с токсином коклюша моноцитов крови человека
4 3.2.6. Влияние супернатанта разрушенных стрептококков на уровень экспрессии адгезионных молекул на моноцитах крови человека 77
3.2.7. Влияние супернатанта разрушенных стрептококков на секрецию цитокинов мононуклеарными лейкоцитами 78
3.2.8. Влияние супернатанта разрушенных стрептококков на уровень экспрессии фосфокиназ моноцитами крови человека 79
3.3. Влияние супернатанта разрушенных стрептококков на функции эндотелиальных клеток 81
3.3.1. Влияние супернатанта разрушенных стрептококков на уровень экспрессии адгезионных молекул на поверхности эндотелиальных клеток 81
3.3.2. Влияние супернатанта разрушенных стрептококков на уровень экспрессии фосфо-NFKB в эндотелиальных клетках 83
3.4. Исследование токсического эффекта супернатанта разрушенных стрептококков на мононуклеарные лейкоциты крови человека и клетки перевиваемых линий ТНР-1 и EA.hy
926 84
ГЛАВА 4. Обсуждение 86
4.1. Влияние супернатанта разрушенных стрептококков на функции клеток линии ТНР-1 86
4.2. Влияние супернатанта разрушенных стрептококков на функции моноцитов крови человека 89
Заключение 94
Выводы 96
Список используемой литературы
