Введение
Глава 1 Стресс как биологическая функция адаптации и эволюции микроорганизмов 13
1.1 Влияние различных стрессоров на жизнедеятельность микроорганизмов 13
1.2 Роль стрессового воздействия в адаптации и эволюции холерных вибрионов 22
Собственные исследования 30
Глава 2 Материалы и методы 30
2.1 Штаммы 30
2.2 Реактивы, диагностические препараты, дезинфектанты 32
2.3 Оборудование 32
2.4 Питательные среды 33
2.5 Лабораторные животные 33
2.6 Методики создания стресса у холерных вибрионов 33
2.6.1 Методика создания кислотного стресса 33
2.6.2 Методика создания щелочного стресса 35
2.6.3 Методика определения стрессорного влияния желчи 35
2.6.4 Методика создания микроаэрофильного стресса 36
2.6.5 Методика создания температурного стресса 37
2.7 Методики изучения свойств холерных вибрионов 38
2.8 Методика определения уровня токсинопродукции 38
2.9 Методика определения полиамина кадаверина 39
2.10 Методика получения и количественной оценки биопленок холерных вибрионов 40
2.11 Методика определения продукции экзополисахарида 42
2.12 Методика определения антилизоцимной активности 43
2.13 Молекулярно- генетические методы исследования 44
2.14 Статистическая обработка результатов 45
Глава 3 Влияние стрессового воздействия на продукцию холерного токсина 46
3.1 Оценка продукции холерного токсина в опытах, моделирующих воздействие стрессоров на возбудителя холеры в организме человека 46
3.2 Токсинопродукция холерных вибрионов О1 серогруппы в условиях, имитирующих существование в окружающей водной среде 49
3.3 Анализ стабильности генома холерных вибрионов О1 серогруппы в условиях стрессового воздействия 58
Глава 4 Влияние стрессового воздействия на агглютинабельность холерных вибрионов О1 серогруппы 63
4.1 Изучение агглютинабельности холерных вибрионов в опытах, моделирующих воздействие стрессоров в организме человека 63
4.1.1 Изучение влияния гипоксии на антигенные свойства холерных вибрионов 63
4.1.2 Изучение влияния желчи на агглютинабельность холерных вибрионов О1 серогруппы 68
4.1.3 Изучение влияния комбинированного стресса на агглютинабельность холерных вибрионов 69
4.2 Изучение агглютинабельности холерных вибрионов при культивировании в речной воде в условиях температурного стресса и гипоксии 70
Глава 5 Влияние стресса на свойства, обусловливающие персистентный потенциал холерных вибрионов 72
5.1 Влияние стрессового воздействия на образование холерными вибрионами биопленок и продукцию экзополисахарида 72
5.1.1 Образование биопленок в опытах, моделирующих воздействие стрессоров в организме человека 73
5.1.2 Влияние температурного стресса на образование биопленок в опытах, моделирующих условия персистирования холерных вибрионов в речной воде 77
5.2 Изучение влияния стрессоров на продукцию кадаверина холерными вибрионами О1 серогруппы 85
5.3 Влияние стрессового воздействия на антилизоцимную активность 90
5.3.1 Изучение влияния температуры и гипоксии на антилизоцимную активность холерных вибрионов 90
5.3.2 Изучение влияния стрессоров, имитирующих эндогенные факторы желудочно-кишечного тракта на антилизоцимную активность холерных вибрионов 91
Список сокращений 93
Заключение 94
Выводы 105
Приложение 106
Список литературы 115
