Введение
Глава 1. Современные представления о роли системы про- и антиоксид антов, окислительной модификации белков в развитии окислительного стресса 11
1.1. Окислительный стресс в патогенезе воспаления 11
1.2. Факторы цитотоксичности фагоцитов 16
1.3. Свободнорадикальное окисление макромолекул 23
1.3.1. Окислительная модификация белков 25
1.4. Механизмы антиоксидантной защиты 33
1.4.1. Ферментативные антиоксиданты 35
1.4.2. Неферментативные антиоксиданты 42
1.5. Окислительная модификация белков и состояние тиолдисульфидной системы при окислительном стрессе 46
Заключение 49
Глава 2. Материал и методы исследования 50
2.1. Материал исследования 50
2.1.1. Клиническая характеристика пациентов с внебольничной пневмонией 51
2.1.2. Экспериментальный блок исследования 53
2.2. Методы исследования 56
2.2.1. Выделение нейтрофилов крови 56
2.2.2. Культивирование нейтрофилов крови 57
2.2.3. Определение содержания провоспалительных цитокинов в супернатантах культур нейтрофилов крови 58
2.2.4. Определение активности миелопероксидазы нейтрофилов крови 59
2.2.5. Определение уровня продукции гидроксильного радикала нейтрофилами крови 59
2.2.6. Определение содержания восстановленного и окисленного глутатиона в нейтрофилах крови 60
2.2.7. Определение концентрации SH-групп белков в нейтрофилах крови 61
2.2.8. Определение содержания белково-связанного глутатиона в нейтрофилах крови 61
2.2.9. Определение активности глутатионпероксидазы в нейтрофилах крови 62
2.2.10. Определение активности тиоредоксинредуктазы в нейтрофилах крови 63
2.2.11. Определение содержания карбонильных производных белков в нейтрофилах крови 63
2.2.12. Определение концентрации белка в нейтрофилах крови 64
2.2.13. Определение содержания ТБК-активных продуктов в плазме крови 65
2.2.14. Определение содержания карбонильных производных белков плазмы крови 66
2.2.15. Определение содержания битирозина и окисленного триптофана в плазме крови 67
2.2.16. Определение активности каталазы в плазме крови 68
2.2.17. Определение содержания церулоплазмина в плазме крови 68
2.2.18. Определение концентрации общего белка в плазме крови 69
2.3. Статистическая обработка результатов 69
Глава 3. Результаты собственных исследований 70
3.1. Клинический блок исследования 70
3.1.1. Функциональное состояние нейтрофилов крови у пациентов с внебольничной пневмонией 70
3.1.2. Оценка параметров перекисного окисления липидов и антиоксидантной системы плазмы крови у пациентов с внебольничной пневмонией 73
3.1.3. Состояние тиолдисульфидной системы в нейтрофилах крови у пациентов с внебольничной пневмонией 75
3.1.4. Окислительная модификация белков нейтрофилов и плазмы крови у пациентов с внебольничной пневмонией 78
3.2. Экспериментальный блок исследования 82
3.2.1. Функциональный статус, состояние тиолдисульфидной системы и окислительная модификация белков нейтрофилов у пациентов с внебольничной пневмонией и в условиях окислительного стресса in vitro 83
3.2.2. Влияние блокатора и протектора SH-групп, ингибиторов синтеза глутатиона и каталазы на функциональное состояние нейтрофилов крови у пациентов с внебольничной пневмонией и при окислительном стрессе in vitro 87
3.2.3. Влияние блокатора и протектора SH-групп, ингибиторов синтеза глутатиона и каталазы на состояние тиолдисульфидной системы нейтрофилов крови у пациентов с внебольничной пневмонией и при окислительном стрессе in vitro 93
3.2.4. Влияние блокатора и протектора SH-групп, ингибиторов синтеза глутатиона и каталазы на окислительную модификацию белков в нейтрофилах крови у пациентов с внебольничной пневмонией и при окислительном стрессе in vitro 98
Глава 4. Обсуждение результатов исследования 103
Выводы 143
Список литературы 145
