Введение
1. Обзор литературы 9
1.1. Строение мембран грамотрицательных бактерий 10
1.2 Характеристика липидов мембран грамотрицательных бактерий 10
1.2.1. Особенности липидного состава 10
1.2.1.1. Функции цвиттерионных липидов 12
1.2.1.2 Функции анионных фосфолипидов 13
1.2.2. Шаперонное действие бактериальных липидов 15
1.2.3. Особенности состава жирных кислот 16
1.3. Полиморфизм мембранообразующих липидов бактерий 19
1.4. Влияние внешних факторов на физико-химические свойства фосфолипидного матрикса мембран бактерий 23
1.4.1. Влияние температуры 25
1.4.2. Влияние тяжелых металлов 27
1.4.3. Влияние глюкозы и аэрации 29
2. Материалы и методы 31
2.1. Биологические объекты 31
2.1.1. Условия культивирования 31
2.2. Экстракция липидов 32
2.3. Микротонкослойная хроматография липидов 33
2.3.1. Системы растворителей для разделения липидов 33
2.3.2. Обнаружение липидов 33
2.4. Количественное определение липидов 34
2.4.1. Определение общих липидов 34
2.4.2. Определение фосфолипидов 34
2.4.3. Анализ состава жирных радикалов липидов 36
2.5. Калориметрический анализ липидов 36
2.6. Анализ бислойных липидных мембран 37
2.7. Атомно-адсорбционный анализ 37
2.8. ДСН-электрофорез и иммуноблоттинг 37
2.9. Количественный анализ результатов 38!
3. Результаты и обсуждение 39
3.1. Влияние ионов тяжелых металлов и температуры культивирования на термотропное поведение липидов металлрезистентных штаммов Pseudomonasputida 39
3.1.1. Сравнительная характеристика роста и липидного состава Pseudomonas putida IB28 и Pseudomonas putida IB 13 41
3.1.2. Сравнительная характеристика жирнокислотного состава Pseudomonas putida IB28 и Pseudomonas putida IB13 48
3.1.3. Фазовые переходы общих липидов мембран Pseudomonas putida;IB2& и Pseudomonas putida IB 13 51
3.1.4. Анализ сорбционной способности липидов Pseudomonas putida\KL% и Pseudomonas putida IB 13 56
3.1.5. Анализ проницаемости бислойных липидных мембран на основе липидов Pseudomonas putida IB28 57
3.2. Влияние условий культивирования на термотропное поведение липидов- Yersinia pseudotuberculosis 62
3.2.1. Влияние температуры, условий аэрации и глюкозы на липидный состав Yersinia Pseudotuberculosis 63
3.2.2. Влияние температуры, условий аэрации и глюкозы на жирнокислотныи-состав липидов Yersinia pseudotuberculosis 69і
3.2.3. Влияние температуры, условий аэрации- и глюкозы на фазовые переходы липидов Yersinia pseudotuberculosis 73
3 3.3. Влияние адаптационных изменений в содержании лизофосфатидилэтаноламина Yersinia pseudotuberculosis на конформацию OmpF-белка (порина) 82
Выводы 87
Список литературы 89
