Список используемых сокращений....................................................................... 5
Введение................................................................................................................... 6
Глава 1. Обзор литературы. Механизмы сезонного аффективного
расстройства и роль 5-HT системы мозга в механизмах сезонного
аффективного расстройства.
1.1. 5-HT система мозга млекопитающих....................................................... 13
1.1.1. Общая организация 5-HT системы мозга млекопитающих............ 13
1.1.2. ТПГ1 и ТПГ2. ...................................................................................... 16
1.1.3. Рецепторы 5-HT................................................................................... 18
1.1.3.1. 5-HT1A рецептор.............................................................................. 19
1.1.3.2. 5-HT2A рецептор.............................................................................. 20
1.1.4. SERT...................................................................................................... 21
1.1.5. MAOA и MAOБ................................................................................... 22
1.2. Сезонное аффективное расстройство (САР)........................................... 23
1.2.1. Симптоматика и эпидемиология........................................................ 23
1.2.2. Циркадные ритмы и САР.................................................................... 23
1.2.2.1. Фотопериодическая гипотеза.......................................................... 24
1.2.2.2. Гипотеза смещения фазы................................................................. 25
1.3. 5-HT система мозга и САР ........................................................................ 25
1.4. Моделирование САР .................................................................................. 28
1.5. Лабораторные рыбы вида Danio rerio как возможный объект изучения
механизма САР и роли 5-HT системы мозга в механизме САР ................... 30
Глава 2. Материалы и методы ............................................................................. 35
2.1. Животные................................................................................................... 35
2.1.1. Мыши ................................................................................................... 35
2.1.2. Рыбы. .................................................................................................... 37
2.2. Измерения суточной активности мышей в домашней клетке ............... 39
3
2.3. Автоматическая трассировка мышей в стандартной батарее
поведенческих тестов. ...................................................................................... 40
2.3.1. Тест «открытое поле» ......................................................................... 40
2.3.2. Тест «приподнятый крестообразный лабиринт» ............................. 41
2.3.3. Тест «принудительное плавание»...................................................... 42
2.4. Измерение активности группы D. rerio в домашнем аквариуме ........... 41
2.5. Тест "новый аквариум"_______________________________________43
2.6. Измерение уровня и обмена 5-HT в мозге............................................... 45
2.7. Определения активности ТПГ в головном мозге D. rerio...................... 46
2.8. Определение активности МАО в мозге D. rerio...................................... 46
2.9. Определение белка по Брэдфорду ............................................................ 48
2.12. Выделение общей РНК............................................................................ 49
2.13. Синтез кДНК и количественая ПЦР реального времени..................... 50
2.14. Статистика................................................................................................. 51
Глава 3. Результаты исследований....................................................................... 52
3.1. Влияние мутации C1473G и длины светового дня на поведение и 5-HT
систему мозга мышей (Эксперимент 1).......................................................... 52
3.1.1. Влияние мутации C1473G и длины светового дня на суточную
динамику активности, сна, суточное потребление пищи и воды в
домашней клетке ........................................................................................... 52
3.3.2. Влияние мутации C1473G и длины светового дня на поведение в
тестах «открытое поле» и «приподнятый крестообразный лабиринт»... 55
3.3.3. Влияние мутации C1473G и длины светового дня на поведение в
тесте «принудительное плавание» .............................................................. 58
3.3.3. Влияние мутации C1473G и длины светового дня на уровень 5-HT,
5-HIAA и соотношение 5-HIAA/5-HT в мозге мышей.............................. 59
3.2. Влияние пола и длины светового дня на рыб вида D.rerio (Эксперимент
2).......................................................................................................................... 62
4
3.2.1. Влияние длины светового дня на пол рыб........................................ 62
3.2.2. Влияние пола и длины светового дня на массу тела рыб ............... 63
3.2.3. Влияние пола и длины светового дня на поведение рыб в тесте
«новый аквариум»......................................................................................... 64
3.2.5. Влияние пола и длины светового дня на активности ТПГ и МАО в
мозге рыб........................................................................................................ 68
3.2.6. Влияние пола и, длины светового дня на экспрессию генов Tph1a,
Tph1b, Tph2, Mao, Slc6a4, Htr1aa, Htr2aa в мозге рыб............................... 69
3.3. Влияние длины светового дня и pCPA на рыб вида D.rerio
(Эксперимент 3)................................................................................................. 70
3.3.1. Влияние длины светового дня и pCPAна пол рыб........................... 70
3.3.2. Влияние длины светового дня и pCPA на массу тела рыб.............. 70
3.5.3. Влияние длины светового дня и pCPA на активность рыб в
домашнем аквариуме. ................................................................................... 71
3.3.4. Влияние длины светового дня и pCPA на поведение рыб в тесте
«новый аквариум»......................................................................................... 74
3.3.5. Уровень pCPA в мозге рыб ................................................................. 75
3.3.7. Влияние длины светового дня и pCPA на экспрессию генов Tph1a,
Tph1b, Tph2, Mao, Htr1aa, Htr2aa в мозге рыб ........................................... 76
Глава 4. Обсуждение результатов ........................................................................ 78
Заключение............................................................................................................. 94
Выводы................................................................................................................... 97
Список литературы ............................................................................................... 98
