Введение
1. Обзор литературы
1.1. Свойства и функции лектинов грибов
1.1.1. Общее понятие о лектинах 20
1.1.2. Предполагаемая роль лектинов грибов 22
1.1.3. Биологические свойства грибных лектинов 28
1.1.4. Применение грибных лектинов 33
1.2. Морфолого-культуральные и физиолого-биохимические особенности lentinus edodes (berk.) sing [lentinula edodes (berk.) pegler]
1.2.1. Краткая характеристика Lentinus edodes 39
1.2.2. Lentinus edodes - гриб "белой" гнили 42
1.2.3. Питательные свойства и медицинское значение Lentinus edodes 48
1.3. Значение экзогенных низкомолекулярных соединений в жизнедеятельности мицелиальных культур
1.3.1. Соединения селена в процессах жизнедеятельности биотехнологически значимых грибных культур 55
1.3.1.1. Селен - составляющая часть минерального питания грибов ...55
1.3.1.2. Химия селена в живой клетке 58
1.3.1.3. Влияние искусственных добавок селенсодержащих веществ на развитие грибных культур 61
1.3.2. Соединения меди в биохимии микроорганизмов ..64
1.3.3. Фитогормон (З-индолил-3-уксусная кислота в искусственной культуре базидиомицетов 68
2. Материалы и методы исследования
2.1. Объекты исследования, условия культивирования 75
2.2. Методы исследования
2.2.1. Получение чистой мицелиальной культуры и плодовых тел L. edodes 77
2.2.2. Пробоотбор грибных изолятов с плотных и жидких сред ...79
2.2.3. Определение ростовых характеристик грибной культуры 79
2.2.4,Определение гемагглютинирующей активности 80
2.2.5. Установление зависимости активности лектинов
от условий культивирования 80
2.2.6. Определение углеводной специфичности агглютининов 81
2.2.7. Определение молекулярной массы белков 82
2.2.8. Анализ аминокислотного состава 82
2.2.9. Хроматографический анализ углеводов 82
2.2.10. Дериватизация углеводных фракций 83
2.2.11. Анализ жирнокислотного состава ...84
2.2.12. Получение антител к лектинам 84
2.2.13. Иммуноферментный анализ 85
2.2.14. Определение индольных и фенольных соединений 85
2.2.15. Рентгенофазовый анализ 85
2.2.16. Спектральный анализ ЯМР Н 86
2.2.17. ИК спектральный анализ 86
2.2.18. Расчетные методы квантовой химии и QSAR ...86
2.2.19. Статистическая обработка экспериментальных данных 87
3. Результаты и обсуждение
3.1. Обнаружение, выделение, очистка, определение специфичности гемагглютининов lentinus edodes
3.1.1. Обнаружение внеклеточных лектиновL. edodes 88
3.1.2. Выделение и очистка, определение углеводной специфичности лектинов 97
3.2. Зависимость лектиновой активности от условий культивирования 113
3.2.1. Влияние температуры, дозы посевного мицелия, возраста культуры на лектиновую активность L. edodes 114
3.2.2. Активность внеклеточных лектинов/,. edodes в зависимости от источников углерода и азота ...122
3.2.3. Эффект некоторых низкомолекулярных компонентов среды: эксперимент и квантовохимическое рассмотрение
3.2.3.1. Катионы двухвалентных металлов .133
3.2.3.2. Катионы металлов триады железа .145
3.2.3.3. Селен в органической форме 156
3.2.4. Воздействие неблагоприятных факторов на лектиновую активность/,, edodes 168
3.3. Физико-химическая характеристика пектинов lentinus edodes
3.3.1. Внеклеточный гликопротеин L. edodes — пектин.L1 177
3.3.2. Внеклеточный протеогликан L. edodes - лектин L2 ...185
3.4. Лектины шиитаке в процессах морфогенеза
3.4.1. Лектиновая активность//, edodes на разных стадиях .«* формирования плодовых тел 205
3.4.2. Формирование пигментированной мицелиальной пленки в глубинной культуре шиитаке в зависимости от активности внеклеточных лектинов
3.4.3. Взаимосвязь углеводной специфичности лектинов и углеводного состава мицелия L. edodes
на разных стадиях морфогенеза 219
3.4.4. Изменение жирнокислотного состава общих липидов и лектиновой активности/,, edodes в процессе морфогенеза 228
3.5. Лектины шиитаке при взаимодействии с экзогенными соединениями
3.5.1. Взаимодействие лектинов с органическими селенсодержащими веществами 235
3.5.1.1. Влияние селенсодержащих соединений на активность внеклеточных лектинов L. edodes 235
3.5.1.2. Изменение характеристик взаимодействия лектинов с селенорганическими соединениями в зависимости от стадии очистки препарата лектина 239
3.5.1.3. Изменение характеристик взаимодействия лектинов с селенорганическими соединениями в зависимости от концентрации селенсодержащих соединений 245
3.5.1.4. Квантовохимические и QSAR свойства селенсодержащих соединений ряда 1,5-ди(4-К-фенил)-3-селенпентандионов-1,5 ...248
3.5.1.5. Сравнительный анализ реакционной способности L-цистеина и L-метионина: некоторые теоретические предпосылки замещения атома серы на селен 256
3.5.2. Взаимодействие лектинов с катионами меди (II) 272
3.5.3. Взаимодействие экзолектинов шиитаке с фитогормоном ИУК 287
Заключение 293
Выводы 301
Литература 304
Приложение
