Введение
Глава 1. Обзор литературы
1.1. Основные представления о структуре и физико-химических свойствах амилолитических ферментов
1.2. Применение амилолитических ферментов в различных промышленных производствах и медицине
1.3. Методы иммобилизации амилолитических ферментов
1.4. Носители для иммобилизации энзимов
Глава 2. Объект и методы исследования
2.1. Объект исследования
2.2. Методы исследования
2.2.1. Методика сорбционной иммобилизации глюкоамилазы
2.2.2. Определение содержания белка в препарате стандартным методом Лоури
2.2.3. Подготовка коллагена, выделенного из соединительной ткани крупного рогатого скота и дермы прудовых рыб, к иммобилизации
2.2.4. Выделение пищевых волокон их свекловичного жома
2.2.5. Глюкозооксидазный метод определения каталитической активности глюкоамилазы
2.2.6. Подготовка исследуемых образцов к анализу методом ИК-спектрофотометрии 55
2.2.7. Методика определения различных типов вторичных структур в молекуле глюкоамилазы 56
2.2.8. Определение размеров молекул методом динамического светорассеивания 58
2.2.9. Методика атомно-силовой микроскопии 59
2.2.10. Статистическая обработка результатов экспериментов 60
Глава 3. Разработка гетерогенных препаратов глюкоамилазы на основе коллагена 61
3.1. Исследование условий адсорбционной иммобилизации глюкоамилазы на коллагене
3.2. Физико-химические свойства глюкоамилазы, иммобилизованной на коллагене 63
3.3. Кинетические свойства глюкоамилазы, иммобилизованной на коллагене 67
3.4. Воздействие УФ-излучения на физико-химические свойства иммобилизованной глюкоамилазы 70
Глава 4. Исследование закономерностей процесса термической инактивации глюкоамилазы, иммобилизованной на коллагене 74
4.1. Изучение кинетических особенностей процесса термической инактивации свободной и иммобилизованной глюкоамилазы 74
4.2. Термодинамические аспекты процесса термической инактивации свободной и иммобилизованной глюкоамилазы 82
Глава 5. Разработка гетерогенных препаратов глюкоамилазы на углеводных полимерах 85
5.1. Подбор оптимальных условий для наиболее эффективной иммобилизации глюкоамилазы на углеводных носителях 85
5.2. Физико-химические свойства глюкоамилазы, иммобилизованной на альгинате натрия и пищевых волокнах 86
5.3. Исследование кинетических параметров глюкоамилазы, иммобилизованной на углеводных полимерных носителях 89
5.4. Термостабильность свободной и иммобилизованной
глюкоамилазы на альгинате натрия и пищевых волокнах 93
Глава 6. Исследование механизма взаимодействия молекул глюкоамилазы с коллагеном и углеводными носителями 97
6.1. Исследование структуры глюкоамилазы при адсорбционной иммобилизации на коллагене 97
6.2. Исследование структуры глюкоамилазы при адсорбционной иммобилизации на углеводных полимерах 105
6.3. Исследование механизма взаимодействия глюкоамилазы с носителями с помощью компьютерных программ Maestrо 9.6, Mоle 2.0, GRAMM-X 113
Глава 7. Иммобилизация глюкоамилазы адсорбционным методом на углеродных нанотрубках 126
7.1. Исследование процесса адсорбционной иммобилизации глюкоамилазы на УНТ 126
7.2. Исследование физико-химических свойств глюкоамилазы,
иммобилизованной на нанотрубках 132
Заключение 136
Выводы 141
Приложение 143
Список использованных источников 167
