Введение
2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 6
2.1. Характеристика онкогенов 6
2.2. Продукты онкогенов 23
2.3. Большие концевые повторы 33
2.4. Химический и радиационный канцерогенез в свете концепции онкогена *... 35
2.5. Экспрессия онкогенов в человеческих опухолях... 37
3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 48
3.1. Выделение РНК 48
3.1.1. Центрифугирование в хлористом цезии 49
3.1.2. Метод экстракции горячим фенолом 49
3.2. Денатурирующий электрофорез РНК в агарозном геле.
3.3. Перенос денатурированной РНК на нитроцеллкшозный фильтр 51
3.4. Гибридизация РНК 51
3.5. Выделение ДНК 52
3.6. Электрофорез ДНК 52
3.7. Перенос фрагментов ДНК из геля на нитроцеллкшозный фильтр 52
3.8. Гибридизация ДНК 53
3.9. Экспозиция фильтров 53
3.10. Выделение плазмидной ДНК 53
3.11. Клонирование ДНК 55
3. II. I. Приготовление векторной ДНК 55
3.II.2. Приготовление вставки 55
З.II.З. Лигирование 55
З.ІІ.4. Трансформация клеток E.coli 56
3.12. Рестрикционный анализ ДНК 57
3.13. Выделение фрагментов ДНК из агарозных гелей 57
3.14. Введение метки в ДНК 57
3.15. Трансформация НІН ЗТЗ клеток 58
3.16. Получение опухолей на бестимусных мышах 58
4. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ 60
4.1. Анализ РНК опухолевых и нормальных клеток человека.. . 60
4.1.1. Получение онк-специфических зондов 61
4.1.2. Транскрипция онкогенов в клетках различных опухолей и нормальных тканей 64
4.1.3. Изменения размеров транскриптов и уровня экспрессии при опухолевом росте 74
4.1.4. Анализ экспрессии онкогена ras в клетках нормальной и опухолевой ткани молочной железы 78
4.2. Трансформация НШ ЗТЗ клеток ДНК из опухолей человека и дальнейшее получение опухолей на бестимусных мышах 81
4.3. Гибридизация онк-зондов с ДНК, выделенной из крови больных разными формами лейкозов 85
5. ВЫВОДЫ 90
6. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 92
