Введение
Часть I. Обзор литературы. 7
Глава 1 Структура, функции и физиология митохондрий млекопитающих 7
1.1. Специфика генетической системы митохондрий 7
1.2. Структура, содержание генов, и организация мтДНК млекопитающих 8
1.3. Транскрипция мтДНК и процесеинг РНК 11
1.4. Репликация мтДНК
Регуляция экспрессии и репликации мтДНК 19
1.5. Нуклеазная активность в митохондриях 22
1.6. Митохондриальная РТР 23
Глава 2. Дисфункция митохондрий и нестабильность мтДНК при действии генотокстеких агентов (облучения и блеомицина) 27
2.1, Действие облучения 27
2.2.Структура и принцип действия антибиотика блеомицина 30
2.3. Апоптоз 33
Роль митохондрий в апоптозе 35
Глава 3. Происхождение и эволюция митохондрий 3 7
Часть II Собственные исследования 41
Глава 1. Материалы и методы. 41
1.1. Лабораторные животные . 41
1.2. Облучение 41
13. Выделение митохондрий мозга 41
1.4. Измерение скорости потребления 02 в суспепзии изолированных митохондрий мозга42
1.5. Измерение ДЧ-т 42
1.6. Выделение ДНК 42
1.6.1, Выделение ДНК из митохондрий , 42
1.6.2. Выделение ДНК из цитозольной фракции (сорбция на магнинтых сорбентах) 43
1.7. Выделение РНК 43
1.7.1. Выделение РНК с использованием тиоцианата гуаншшна 43
1.7.2. Выделение РНК на магнитных сорбентах 43
1.7.3. Выделение мРНК из тотальной РНК 44
1.8. Синтез первой цепи кДНК 44
1.9. Полимеразная цепная реакция [ПЦР] 44
1.9.1. ПЦР в реальном времени , 45
1.9.1,1, Краткая теория метода ПЦР в реальном времени 46
1.10. Определи не нуклеазной активности 4S
1.11. Определение активности цитратсинтазы 49
Глава 2. Результаты и их обсуждение 50
2.1.Биогенез мтДНК в ответ на действие облучения и блеомицина 50
2.1,1.Количество копий мтДНК в клетках головного мозга и селезенки контрольных мышей 52
2.1.2. Репликация мтДНК при действии ИР 53
2.1.3. Транскрипция мтДНК в клетках головного мозга и селезенки контрольных мышей 55
2.1.4 Транскрипция мтДНК при действии ИР 58
2.1,5. Транскрипция мтДНК при действии блеомицина 62
2.2. Элиминация фрагментов мтДНК. 66
2,2.1, Выход ДНК из митохондрий in vitro 69
2.2.2 Выход фрагментов мтДНК из митохондрий в тканях облученных мышей in vivo 73
2.3 Функциональное состояние митохондрии тканей облученных мышей 76
2.4. Эндонуклеаза-G и ее роль в фрагментации мтДНК 78
Заключение 83
Выводы 86
Список цитированной литературы 87
Список работ по теме диссертации 106
