Введение
1. Система транспорта ионов калия в митохондриях 13
1.1. Физиологическое значение транспорта К+ в митохондриях 14
1.2. Молекулярные структуры, ответственные за транспорт К+ в митохондриях 15
1.3. Митохондриальный АТФ-зависимый калиевый канал как компонент системы транспорта К+ 1.3.1. Биофизические свойства и структурная организация митоКлтФ IV
1.3.2. Метаболические и фармакологические модуляторы митоКлтФ
2. Гипоксия и митохондриальные механизмы адаптации, связанные с образованием активных форм кислорода 29
3. Функциональная роль МИТОКАТФ В физиологических и патологических состояниях, связанных с развитием гипоксии
3.1. Участие МИТОКАТФ В физиологических процессах 35
3.2. Участие МИТОКАТФ В адаптации организма к гипоксии
3.2.1. Роль митоКлтФ в механизмах кардиопротекции 38
3.2.2. Возможные механизмы кардиопротекции, опосредованные митоКлтФ 43
3.2.3. Роль митоКлтФ в нейропротекции 45
Материалы и методы 49
1. Реагенты 49
2. Линии животных, использованные в исследовании
2.1. Линия животных Август 49
2.2. Линия крыс Крушинского-Молодкиной 49
3. Типирование животных по чувствительности к гипоксии 50
4. Адаптация животных к гипоксии. 51
5. Выделение митохондрий из ткани печени крыс 51
6. Выделение митохондрий из ткани сердца крысы... 52
7. Выделение митохондрий из ткани мозга крысы 52
8. Определение концентрации белка методом Лоури .53
9. Изучение энергозависимого входа К+ в митохондрии методом спектрофотометрии .53
10. Полярографическое измерение скорости потребления кислорода и определение параметров дыхания митохондрий .54
11. Определение скорости образования перекиси водорода в митохондрия 55
12. Исследование АТФ-зависимого ДНФ-индуцированного выхода К+ из митохондрий при помощи К+-селективного электрода... 55
13. Определение количестваК+ в митохондрия 56
14. Оценка содержания малонового диальдегида в митохондриях крыс 56
15. Изучение морфологических изменений в митохондриях с помощью электронной микроскопи 57
16. Оценка выносливости крыс к физической нагрузке... 57
17. Статистическая обработка данны 57
Результаты и обсуждение 58
ГЛАВА 1. Изучение АТФ-зависимого К+ транспорта и скорости образования перекиси водорода в митохондриях крыс с различной устойчивостью к гипоксии 58
1.1. Изучение митохондриального АТФ-зависимого К+ транспорта у крыс с различной устойчивостью к гипокси 59
1.2. Измерение продукции Н2О2 митохондриями устойчивых и неустойчивых к гипоксии крыс... 61
1.3. Параметры К+ обмена в митохондриях неустойчивых к гипоксии крыс,
адаптированных к условиям с низким содержанием кислород 62
ГЛАВА 2. Окислительное фосфорилирование и транспорт ионов калия в митохондриях крыс линий Август и Вистар с различной устойчивостью к стрессу и гипокси 66
2.1. Измерение параметров дыхания митохондрий исследуемых линий крыс.. 66
2.2. Энергозависимый транспорт ионов калия в митохондриях крыс Август и Вистар 69
2.3. Скорость образования перекиси водорода в митохондриях печени крыс Август и Вистар в условиях активации и ингибирования МИТОКДТФ канала 70
ГЛАВА 3. Изучение АТФ-зависимого транспорта К+ и образования активных форм кислорода в митохондриях мозга и печени крыс при экспериментальной аудиогенной эпилепсии (модель Крушинского-Молодкиной) 73
3.1. Определение параметров дыхания и фосфорилирования митохондрий крыс в модели аудиогенной эпилепсии 74
3.2. Оценка скорости образования перекиси водорода в митохондриях мозга и печени исследуемых групп крыс.. 76
3.3. Определение концентрации малонового диальдегида в митохондриях исследуемых групп крыс .77
3.4. Определение параметров транспорта ионов калия в митохондриях мозга и печени крыс в модели аудиогенной эпилепсии
3.4.1. Энергозависимый вход 1С в митохондриях исследуемых групп животны 80
3.4.2. ДНФ-стимулируемый транспорт 1С в митохондриях исследуемых групп кры 80
3.4.3. Оценка содержания 1С в митохондриях исследуемых групп кры 81
ГЛАВА 4. Изучение роли митохондриального АТФ-зависимого К+ канала в формировании выносливости животных к повышенным физическим нагрузкам 83
4.1. Оценка влияния природного активатора МИТОКАТФ канала in vivo на формирование выносливости крыс к повышенной физической нагрузке 83
4.2. Изучение энергозависимого транспорта К+ и оценка его количества в митохондриях исследуемых групп крыс 85
ГЛАВА 5. Доказательство участия митохондриального АТФ-зависимого калиевого канала в циклическом транспорте К в митохондриях 88
5.1. Регистрация циклического транспорта К+ в митохондриях печени крыс 88
5.2. Влияние модуляторов калиевых каналов на циклический транспорт К+ в митохондриях печени крыс 90
5.3. Выявление морфологических изменений в митохондриях на разных этапах циклического транспорта К+ 91
Заключение 94
Список литературы
