ВВЕДЕНИЕ ...................................................................................................... 5
Глава 1. РЕВМАТОИДНЫЙ АРТРИТ: СОВРЕМЕННЫЙ ВЗГЛЯД НА
ПАТОГНЕЗ И ТЕРАПИЮ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ) ......................................... 12
1.1. Патогенез ревматоидного артрита .................................................... 12
1.2. Лечение ревматоидного артрита ....................................................... 19
1.3. Наносомальные формы препаратов для терапии аутоиммунного
артрита ................................................................................................................... 26
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ .......................................................... 37
2.1. Получение и анализ липосом на основе дексаметазона ................. 37
2.1.1 Реактивы ......................................................................................... 37
2.1.2. Определение размеров липосом .................................................. 37
2.1.3. Количественное определение содержания дексаметазона в
липосомальной суспензии ................................................................................ 37
2.1.4. Кинетика высвобождения дексаметазона из липосомальной
формы in vitro .................................................................................................... 39
2.2. Исследование цитотоксичности липосомальной формы
дексаметазона и её компонентов на культуре клеток ...................................... 40
2.2.1. МТТ-тест ........................................................................................ 40
2.2.2. Тест захвата нейтрального красного .......................................... 41
2.2.3. Флюоресцентная микроскопия ................................................... 42
2.3. Общие принципы и методики исследований in vivo ...................... 42
2.3.1. Анестезия ....................................................................................... 43
2.3.2. Моделирование артрита ............................................................... 43
2.3.3. Гистологическое исследование тканей ...................................... 43
2.4. Исследование безопасности липосомальной формы дексаметазона
при различных путях введения ........................................................................... 44
2.4.1. Внутрисуставное введение .......................................................... 44
2.4.2. Ингаляционное введение ............................................................. 45
2.5. Исследование тканевого распределения дексаметазона ................ 45
2.5.1. Дизайн эксперимента ................................................................... 45
2.5.2. Определение тканевых концентраций дексаметазона .............. 46
2.6. Исследование терапевтической эффективности липосомальной
формы дексаметазона при внутрисуставном введении ................................... 47
2.6.1. Дизайн эксперимента ................................................................... 47
2.6.2. Количественная оценка макроскопических признаков артрита
............................................................................................................................. 48
2.6.3. Гистологическое исследование тканей ...................................... 48
2.6.4. Исследование клеточного состава крови и иммунного статуса
............................................................................................................................. 49
2.6.5. Статистический анализ данных .................................................. 51
ГЛАВА 3. ПОЛУЧЕНИЕ И АНАЛИЗ ЛИПОСОМАЛЬНОГО
ДЕКСАМЕТАЗОНА ............................................................................................... 52
3.1. Синтез липосом с дексаметазоном .................................................... 52
3.2. Кинетика высвобождения дексаметазона из липосом in vitro ....... 55
3.3. Исследование влияния липосом с дексаметазоном на выживаемость
клеток in vitro ........................................................................................................ 56
3.4. Исследование механизмов клеточной гибели под влиянием
липосомального дексаметазона .......................................................................... 62
ГЛАВА 4. ИССЛЕДОВАНИЕ БИОСОВМЕСТИМОСТИ И
БЕЗОПАСНОСТИ ЛИПОСОМАЛЬНОЙ ФОРМЫ ДЕКСАМЕТАЗОНА ПРИ
РАЗЛИЧНЫХ ПУТЯХ ВВЕДЕНИЯ ..................................................................... 66
4.1. Биосовместимость и безопасности липосомальной формы
дексаметазона при внутрисуставном введении ................................................ 66
4.2. Биосовместимость и безопасности липосомальной формы
дексаметазона при ингаляционном введении ................................................... 68
ГЛАВА 5. ФАРМАКОКИНЕТИКА РАЗЛИЧНЫХ ФОРМ
ДЕКСАМЕТАЗОНА ПРИ ВНУТРИСУСТАВНОМ ВВЕДЕНИИ ..................... 71
5.1. Разработка аналитического метода ................................................... 71
5.2. Исследование некоторых параметров фармакокинетики и тканевого
распределения липосомального дексаметазона ................................................ 78
Глава 6. ТЕРАПЕВТИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ
ЛИПОСОМАЛЬНОЙ ФОРМЫ ДЕКСАМЕТАЗОНА ПРИ
ВНУТРИСУСТАВНОМ ВВЕДЕНИИ У КРЫС ................................................... 81
6.1. Оценка функции и макроскопических изменений суставов .......... 81
6.2. Иммунотропные эффекты липосомального дексаметазона и его
влияние на клеточный состав периферической крови ..................................... 92
6.2.1. Клеточный состав периферической крови и содержание
гемоглобина ....................................................................................................... 92
6.2.2. Показатели иммунного статуса ................................................... 94
6.2.3. Цитокиновый профиль ................................................................. 96
ЗАКЛЮЧЕНИЕ ............................................................................................. 99
ВЫВОДЫ ..................................................................................................... 110
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ .................................................... 111
ПЕРСПЕКТИВЫ ДАЛЬНЕЙШЕЙ РАЗРАБОТКИ ТЕМЫ .................... 112
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ ........................................................................ 113
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ .......................................................................... 115
