Введение
Глава 1. Обзор литературы 11
1.1. Костная ткань. Регенерация костной ткани 11
1.2. Скаффолды в инженерии костной ткани 14
1.3. Клеточный подход при получении костных имплантатов в тканевой инженерии 23
1.4. Современные оптические методы доклинического исследования имплантатов 28
Глава 2. Материалы и методы 35
2.1. Объекты исследования 35
2.2. Методы и методики исследования 36
2.3. Схемы экспериментов 47
Глава 3. Результаты
3.1. Характеристика скаффолдов 51
3.2. Биологическое тестирование скаффолдов in vitro
3.2.1. Характеристика и трансфекция ММСК кроликов 53
3.2.2. Флуоресцентный имиджинг миграции и пролиферации ММСКurboFP635 на скаффолдах 54
3.2.3. Оценка количества клеток на поверхности скаффолдов по уровню флуоресценции TurboFP635 57
3.2.4. Оценка жизнеспособности клеток на поверхности скаффолдов 61
3.3. Исследование участия подсаженных ММСК в регенерации костной ткани и формировании сосудов в месте дефекта 62
3.3.1. Характеристика ММСК 63
3.3.2. 3D-культивирование клеток на скаффолдах перед имплантацией 64
3.3.3. Флуоресцентный имиджинг клеток на скаффолдах и оценка формирования костной ткани 66
3.3.4. Флуоресцентный имиджинг сосудов в формирующейся костной ткани после имплантации скаффолда с клетками .. 70
3.4. In vivo изучение скорости биодеградации скаффолдов по уровню флуоресцентного сигнала 72
3.4.1. 3D-культивирование клеток на скаффолдах перед имплантацией 72
3.4.2. In vivo оценка скорости биодеградации скаффолдов по их автофлуоресценции 74
3.4.3. Оценка минерализации и морфологический анализ костного регенерата 77
Глава 4. Обсуждение результатов 81
Заключение 88
Выводы 92
Список цитированной литературы .
