Введение
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
СТРУКТУРА ХРОМАТИНА ТРАНСКРИБИРУЕМЫХ ГЕНОВ 8
1. Электронная микроскопия 9
2. Повышенная чувствительность транскрибируемого хроматина к нуклеазам . 12
3. Гиперчувствительности к нуклеазам отдельных районов хроматина 17
4. Использование микрококковой нуклеазы для анализа нуклеосомной организации хроматина... 23
5. Заключение 29
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
I. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 33
1. Культура клеток и эмбрионы дрозофилы 33
2. Выделение ядер из культуры клеток и эмбрионов дрозофилы 33
3. Гидролиз ядер нуклеазами и электрофорез фрагментов ДНК 35
4. Ковалентное связывание гистонов с ДНК 36
5. Двумерный электрофорез сшитых ДНК-гистоновых комплексов 37
6. Приготовление ДБМ-бумаги и электроперенос фрагментов ДНК на ДБМ-бумагу 38
7. Перенос ДНК на нитроцеллкшозные фильтры 39
8. Выделение плазмидной ДНК 39
9. Расщепление ДНК рестриктазами 40
10. Введение 32Р-метки в ДНК 40
11. Гибридизация ДНК, фиксированной на ДБМ-бумаге или нитроцеллкшозных фильтрах, с клонированными пробами 41
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
1. Исследованные области генома 43
2. Краткая характеристика метода гибридизации с "белковыми тенями" 47
3. Содержание гистонов в транскрибируемой области гена бтш-70 и бтш-22. 50
4. Содержание гистонов в 5»-концевой области гена бтш-70 57
5. Содержание гистонов в 3-концевой области гена бтш-70 60
6. Изменения в структуре хроматина, выявляемые при гидролизе его микрококковой нуклеазой и ДНКазой I. 61
7. Структурные переходы в хроматине 66
ВЫВОДЫ 70
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 71
