Введение
2. Современное состояние методов насыщающего иммуноанализа 9
2.1. Общая характеристика насыщающего иммуноанализа . 9
2.2. Аналитические характеристики: 13
- точность 13
- чувствительность 14
- специфичность 19
- достоверность 21
2.3. Методическая база насыщающего иммуноанализа: 21
- очистка лигандов 21
- специфичные антитела 25
- методы разделения свободной и связанной фракций. 29
- меченый лиганд и разновидности насыщающего иммуноанализа 32
2.4. Радиоиммуноанализ: 32
- йодирование белков 33
- введение йода в соединения небелковой природы . 36
- техника радиоиммуноанализа 37
2.5. Альтернативные методы насыщающего иммуноанализа: 39
- энзимоиммуноанализ 39
- кофакторный иммуноанализ 45
- мембранный иммуноанализ 47
- флуоресцентный иммуноанализ 49
2.6. Заключение 50
3. ЭКСПЕШЛЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ 54
3.1. Материалы 54
3.2. Препаративные биохимические методы 56
3.3. Синтетические методы 60
3.4. Модификация белков 62
3.5. Иммунохимические методы 65
3.6. Физико-химические и биохимические методы анализа 71
3.7. Обработка данных 74
4. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ 75
4.1. Разработка иммунохимической системы "миоглобин - антитела против миоглобина" 75
- выделение и очистка миоглобина из сердечной мышцы человека 75
-получение антисыворотки против миоглобина человека 77
- специфичность иммунохимической системы "миоглобин-антитела против миоглобина" 80
4.2. Разработка быстрого метода радиоиммуноанализана миоглобин, пригодного для экспресс-диагностики острого инфаркта миокардаток
- введение I в миоглобин 84
- оптимизация системы радиоиммуноанализа 88
- характеристики качества анализа 89
- исследование образцов сыворотки доноров и пациентов; возможность применения метода для диагностики острого инфаркта миокарда 94
4.3. Мембранный иммуноанализ: 101
- получение реакциошспособных липосом и их вза-модействие с белками 101
- комплемент-зависимый лизис липосом, сенсибилизированных миоглобином 109
4.4. Система иммуноанализа на миоглобин с использо
ванием АТР в качестве метки (АТФ-метрический
иммуноанализ) 112
- получение и характеризацил меченого АТР миоглобина 113
- АТФ-метрический иммуноанализ на миоглобин. Ц5
- возможности применения АТФ-метрического иммуноанализа для определения миоглобина и других клинически важных соединений в сыворотке крови. 121
5. Выводы 130
6. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 131
