Введение
1. Cовременные методы химического синтеза олигодезоксирибонуклеотидов 8
1.1. Развитие химических методов синтеза олигодезоксирибонуклеотидов 9
1.2. Защитные группы в химическом синтезе олигодезоксирибонуклеотидов 18
1.2.1. Защита гетероциклических оснований 19
1.2.1.1. Блокирование экзоциклических аминогрупп. 19
1.2.1.2. Защита оксо- и иминофункций остатков Giia и Thy 27
1.2.2: Защита гидроксильных групп дезоксирибозы 34
1.2.3. Защита фосфатных групп 42
1.3. Создание межнуклеотидной связи 48
1.3.1. Фосфотриэфирный метод 49
1.3.2. Фосфитный метод 65
1.4. Синтез олигодезоксирибонуклеотидов растворным методом 71
1.5. Синтез олигодезоксирибонуклеотидов на твердой фазе 76
1.6. Удаление защитных групп, выделение и очистка полученных олигодезоксирибонуклеотидов, доказательство их структуры 84
1.6.1. Удаление защитных групп 84
1.6.2. Выделение и очистка синтетических олигодезоксирибонуклеотидов 86
1.6.2.1. Хроматографические методы 86
1.6.2.2. Электрофорез в полиакриламидном геле 90
1.6.3. Анализ структуры синтетических олигодезокси-рибонуклеотидов 91
2. Химический синтез длинных олигодезоксирибо-нуклеотидов 93
3. Экспериментальная часть 120
3.1. Материалы 121
3.1.1. Растворители 121
3.1.2. Реактивы 121
3.1.3. Сорбенты 122
3.2. Оборудование 124
3.3. Методы 124
3.3.1. Получение 5-0 ^-защищенных дезоксирибонуклеозидов 124
3.3.2. Получение З-О-бензоил-^-ацилдезоксирибонуклеозидов 127
3.3.3. Получение защищенных мононуклеотидов 128
3.3.4. Получение динуклеотидных блоков 130
3.3.5. Синтез слигодезоксирибонуклеотидов 131
3.3.6. Получение полностью деблокированных олигодезоксирибонуклеотидов 134
3.3.7. Выделение олигонуклеотидов после полного даления защитных групп 134
Выводы 138
