Введение
ГЛАВА 1. Обзор литературы 15
1.1 Общая характеристика иммуномодуляторов 15
1.2 Принципы функционирования врожденной иммунной системы 17
1.3 Бактериальные иммуномодуляторы как аналоги ПАМП 25
1.4 Иммунобиологические и терапевтические свойства мурамилпептидов 28
1.5 Иммунобиологические и терапевтические свойства микробной ДНК и ее аналогов 45
1.6 Дендритные клетки — связующее звено между врожденным и адаптивным иммунитетом 53
1.7 Роль хемокинов CCL19 и CCL21 в миграции дендритных клеток и клеток адаптивной иммунной системы 56
1.8 Дистанционное управление клеточным составом ЛУ как способ иммуномодулирующего воздействия 59
1.9 Резюме 60
ГЛАВА 2. Материалы и методы 62
2.1 К главе 3 62
2.2 К главе 4 74
2.3 К главе 5 79
2.4 К главе 6 85
2.5 Статистическая обработка данных 90
ГЛАВА 3. Иммунобиологические свойства мурамилпептидов грамотрицательных бактерий 91
3.1 Получение комплекса мурамилпептидов из S. typhi и подтверждение его биологической активности 91
3.2 Влияние мурамилпептидов грамотрицательных бактерий на МФ и ДК человека in vitro 93
3.3 Факторы, определяющие различия в ответе ДК и МФ на мурамилпептиды in vitro 102
3.4 Характеризация рецепторов, участвующих в активации МФ под действием ГМтри и диГМтетра 109
3.5 Характеризация поглощения, процессинга и сигнальных путей ГМтри и диГМтетра ВМФ 114
3.6 Иммуностимулирующая активность производных мурамилпептидов 119
3.7 Индукция толерантности и перекрестной толерантности МФ к мурамилпептидам и ЛПС 120
3.8 Влияние КМП грамотрицательных бактерий на врожденный иммунитет мышей 124
3.9 Обнаружение и характеризация антител к КМП 128
ГЛАВА 4. Клиническая и иммунологическая эффективность комплекса мурамилпептидов грамотрицательных бактерий (препарата «Полимурамил») 133
4.1 I фаза клинических испытаний 134
4.2 П/Ш фаза клинических испытаний 141
ГЛАВА 5. Противоопухолевая активность и механизмы действия CpG-ОДН 7909 у пациентов с метастатической меланомой (II фаза клинических испытаний) 145
5.1 Характеристики пациентов 145
5.2 Терапевтическая эффективность 148
5.3 Нежелательные явления 149
5.4 Изменения фенотипических и функциональных свойств клеток крови в ходе лечения CpG-ОДН 7909 151
5.5 Лабораторные предикторы эффективности CpG-ОДН 7909 161
5.6 Анализ ЛУ, дренирующих места введения CpG-ОДН 7909 161
5.7 Анализ метастазов, прогрессирующих после частичной ремиссии или стабилизации 167
ГЛАВА 6. Дистанционное управление миграцией клеток иммунной системы с помощью трансгенной экспрессии хемокинаССЬ21 в коже 169
6.1 Трансфекция плазмидами, кодирующими mCCL21, приводит к экспрессии и секреции mCCL21 клетками COS-7 in vitro 169
6.2 Трансгенный mCCL21 обладает функциональной активностью 171
6.3 Трансгенный и рекомбинантный CCL21 повышают поглощение декстрана и экспрессию CD40 на ДК 174
6.4 Введение mCCL21-кодирующих плазмид в кожу с помощью генного ружья вызывает экспрессию mCCL21 в эпидермисе с последующей диффузией в дерму и накоплением в дренирующих ЛУ 175
6.5 Внутрикожное введение плазмид, кодирующих mCCL21, вызывает миграцию ДК и различных субпопуляций Т-клеток в дренирующие ЛУ 177
6.6 Внутрикожное введение плазмиды, кодирующей mCCL21, усиливает эмиграцию ДК из трансфицированных участков кожи 180
ГЛАВА 7. Обсуждение 182
7.1 «Полимурамил» — иммуномодулятор на основе естественных мурамилпептидов грамотрицательньгх бактерий 182
7.2 CpG-ОДН 7909 — синтетический аналог бактериальной ДНК с противоопухолевой активностью 203
7.3 Дистанционное управление клеточным составом ЛУ путем трансгенной экспрессии хемокинов в коже 214
7.4 Заключение 217
Выводы 222
Благодарность 224
Список литературы
