Введение
Глава 1. Обзор литературы 12
1.1. Современные представления о папилломавирусной инфекции 12
1.1.1. Биологические свойства вируса папилломы человека 12
1.1.2. Типы папилломавирусов и их клиническое значение 14
1.2. Основные направления лечения и профилактики папилломавирусной инфекции 16
1.2.1. Профилактические вакцины 16
1.2.2. Терапевтические вакцины 17
1.3. Показатели контроля качества терапевтических вакцин 19
1.3.1. Контроль качества гибридных рекомбинантных белков Е7-HSP70 20
1.3.2. Контроль качества лекарственной формы терапевтической вакцины 1.4. Общая токсичность и иммунологическая безопасность вакцин 27
1.5. Иммуногенность терапевтических вакцин против ВПЧ-ассоциированных заболеваний 28
Заключение по главе 31
Глава 2. Материалы и методы исследования 32
2.1. Объекты исследования 32
2.2. Характеристика лабораторных животных 33
2.3. Методы исследования
2.3.1. Фармакопейные методы анализа 34
2.3.2. Физико-химические и иммунохимические методы анализа 35
2.3.3. Проведение валидации аналитических методик 45
2.3.4. Методы изучения острой токсичности 46
2.3.5. Методы изучения иммунотоксичности 47
2.3.6. Методы изучения иммуногенности 50
2.4. Методы статистической обработки результатов исследования 51
Глава 3. Исследование качества и стабильности растворов гибридных рекомбинантных белков на основе белка е7 вируса папилломы человека типа 6 или 11, конъюгированных с белком теплового шока нsp mycobacterium tubеrсulоsis 52
3.1. Определение фармакопейных показателей качества 52
3.2. Определение показателей «Подлинность» и «Посторонние примеси» и валидация методик их определения 53
3.3. Определение показателя «Чистота» и валидация методики его определения 63
3.4. Определение показателя «Содержание белка» и валидация методики его определения 71
3.5. Определение показателя «ДНК штамма-продуцента» и валидация методики его определения 78
3.6. Определение показателя «Белки штамма-продуцента» и валидация методики его определения 86
3.7. Определение показателя «Полисорбат 80» и валидация методики его определения 92
3.8. Определение содержания никеля в растворах рекомбинантных белков 100
3.9. Изучение стабильности растворов целевых белков при долгосрочном хранении 101
Заключение по главе 103
Глава 4. Стандартизация терапевтической вакцины против рецидивирующего респираторного папилломатоза и аногенитального кондиломатоза 106
4.1. Определение фармакопейных показателей качества 106
4.2. Определение показателя «Подлинность» и валидация методики его определения 107
4.3. Определение показателя «Содержание белка» и валидация методики его определения 111
4.4. Определение показателя «Полнота сорбции» и валидация методики его определения 116 4.5. Изучение стабильности при долгосрочном хранении 118
Заключение по главе 120
Глава 5. Исследования острой токсичности, иммунотоксичности и иммуногенности терапевтической вакцины против рецидивирующего респираторного папилломатоза и аногенитального кондиломатоза 121
5.1. Исследование острой токсичности 121
5.2. Исследование иммунотоксичности
5.2.1. Исследование влияния препарата на гуморальный иммунный ответ 125
5.2.2. Исследование влияния препарата на клеточный иммунный ответ 126
5.2.3. Исследование влияния препарата на активность фагоцитов 126
5.2.4. Исследование влияния препарата на функциональную активность Т- и В-лимфоцитов 128
5.3. Исследование иммуногенности 129
Заключение по главе 132
Заключение 134
Выводы 136
Список сокращений и условных обозначений 138
Список литературы 140
