СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ..................................................... 5
1. ВВЕДЕНИЕ.................................................................................................................. 8
2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ............................................................................................. 14
2.1. ВВЕДЕНИЕ............................................................................................................. 14
2.2. CТЕРОИДНЫЕ ИНГИБИТОРЫ CYP17A1 И СТЕРОИДОГЕНЕЗ .................. 15
2.3. CТЕРОИДНЫЕ ИНГИБИТОРЫ CYP17A1 И AR СИГНАЛИНГ..................... 22
2.4. ВЛИЯНИЕ АБИРАТЕРОНА, ГАЛЕТЕРОНА И ЕГО С-3 ЗАМЕЩЕННЫХ
ПРОИЗВОДНЫХ НА ОСНОВНЫЕ РЕГУЛЯТОРНЫЕ ПУТИ КЛЕТКИ.............. 28
2.5. НАРУШЕНИЕ ПРОЧИХ СИГНАЛЬНЫХ ПУТЕЙ КЛЕТКИ ПРИ РПЖ........ 33
2.6. НОВЫЕ АЗОТСОДЕРЖАЩИЕ СТЕРОИДНЫЕ ПРОИЗВОДНЫЕ................ 38
3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ..................................................................................... 48
3. 1. МАТЕРИАЛЫ ....................................................................................................... 48
3.1.1. Реактивы, растворители и стандартные соединения.................................... 48
3.1.2. Синтез оксазолинов 190 и 217 ........................................................................ 48
3.1.3. Синтез оксазолинов 223 – 227 ........................................................................ 50
3.2. ИНСТРУМЕНТАЛЬНЫЕ МЕТОДЫ ................................................................... 53
3.3. РАСЧЕТНЫЕ МЕТОДЫ ....................................................................................... 53
3.3.1. Молекулярный докинг..................................................................................... 53
3.3.2. Молекулярная динамика ................................................................................. 54
3.4. ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ .............................................................. 55
3.5. ИНГИБИРОВАНИЕ АКТИВНОСТИ СYP17А1 СОЕДИНЕНИЯМИ 1, 190,
217, 223 – 227 [146] ....................................................................................................... 55
3.5.1. Получение микросом....................................................................................... 55
3.5.2. Проведение анализа ......................................................................................... 56
3.6. ЭКСПЕРИМЕНТЫ В КЛЕТКАХ КАРЦИНОМЫ ПРОСТАТЫ....................... 56
3.6.1. Клетки................................................................................................................ 56
3
3.6.2. Оценка антипролиферативной активности соединений 190 – 227 в клетках
LNCaP и PC-3 методом МТТ [147]........................................................................... 56
3.6.3. Oценка влияния соединений 190, 217 и абиратерона 1 на апоптоз в клетках
карциномы простаты.................................................................................................. 57
3.7. ОПЫТЫ НА ЖИВОТНЫХ ................................................................................... 58
3.7.1. Животные.......................................................................................................... 58
3.7.2. Фармакокинетика оксазолина 190 и абиратерона при пероральном
введении мышам ........................................................................................................ 58
3.7.3. Влияние оксазолина 190 и абиратерона на уровень тестостерона у мышей
...................................................................................................................................... 59
3.7.4. Влияние оксазолина 190 и абиратерона на рост ксенографтов клеток
22Rv1 и DU-145 у мышей Balb/c nude ..................................................................... 59
3.8. СТАТИСТИЧЕСКАЯ ОБРАБОТКА ДАННЫХ ................................................. 59
4. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ .......................................................................... 61
4.1. ПЕРВИЧНЫЙ СКРИНИНГ АНТИПРОЛИФЕРАТИВНОЙ АКТИВНОСТИ
НОВЫХ АЗОТСОДЕРЖАЩИХ СТЕРОИДНЫХ ПРОИЗВОДНЫХ В КЛЕТКАХ
КАРЦИНОМЫ ПРОСТАТЫ........................................................................................ 61
4.1.1. Антипролиферативная активность новых азотсодержащих стероидных
производных в клетках карциномы простаты LNCaP и PC-3 ............................... 61
4.1.2. Корреляция структура – антипролиферативная активность в ряду новых
азотсодержащих стероидных производных ............................................................ 67
4.2. ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ ОКСАЗОЛИНОВ 190 И 217 С СYP17А1 ..................... 71
4.2.1. Ингибирование активности СYP17А1 оксазолинами 190, 217, 223 – 227. 71
4.2.2. Модели фермент-ингибиторных комплексов СYP17А1 с оксазолинами
190, 217, 223 – 227...................................................................................................... 74
4.3. СРАВНЕНИЕ ЭФФЕКТОВ ОКСАЗОЛИНОВ 190, 217 И АБИРАТЕРОНА 1
НА ЖИЗНЕСПОСОБНОСТЬ И АПОПТОЗ AR-НЕЗАВИСИМЫХ КЛЕТОК
КАРЦИНОМЫ ПРОСТАТЫ........................................................................................ 81
4.3.1. Влияние оксазолинов 190, 217 и абиратерона 1 на жизнеспособность и
апоптоз клеток PC-3 при 72 ч инкубации................................................................ 82
4
4.3.2. Сравнение про-апоптотических эффектов оксазолина 190 и абиратерона 1
в клетках DU-145 при 24 ч инкубации..................................................................... 85
4.4. СРАВНЕНИЕ ОКСАЗОЛИНА 190 И АБИРАТЕРОНА 1 В
ЭКСПЕРИМЕНТАХ IN VIVO ..................................................................................... 90
4.4.1. Фармакокинетика оксазолина 190 и абиратерона 1 при пероральном
введении мышам C57BL/6 ........................................................................................ 90
4.3.2. Влияние оксазолина 190 и абиратерона 1 на уровень тестостерона в
плазме крови мышей C57BL/6.................................................................................. 91
4.3.3. Влияние оксазолина 190 и абиратерона 1 на рост привитой опухоли у
мышей.......................................................................................................................... 92
5. ЗАКЛЮЧЕНИЕ ......................................................................................................... 95
ВЫВОДЫ....................................................................................................................... 97
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ............................................................................................. 98
