Введение
1. Обзор литературы 11
1.1. Белок врожденного иммунитета Tag7 11
1.2. Пептидогликан-распознающие белки 11
1.3. Моноциты, макрофаги и дендритные клетки 16
1.4. Адаптивный иммунный ответ 19
1.5. Активация Т-лимфоцитов 20
1.6. Роль цитокинов в индукции иммунного ответа 22
1.7. Программируемая клеточная смерть 28
1.7.1. Апоптоз 28
1.7.2. Некроптоз 31
1.8. Механизм избегания иммунного ответа 35
2. Материалы и методы 37
2.1. Получение и очистка белков 37
2.2. Культивирование трансформированных клеточных линий 37
2.3. Выделение лимфоцитов из лейкомассы 38
2.4. Выделение моноцитов, NK, CD4+ и CD8+ лимфоцитов 38
2.5. Измерение цитотоксичности 39
2.6. Ингибирование 39
2.7. Проточная цитофлуориметрия 40
2.8. Электрофорез и вестерн-блоттинг 40
2.9. Биотинилирование пептидов 41
2.10. MALDI 41
2.11. Хроматография 41
2.12. ИФА 42
2.13. Количественный ПЦР 42
2.14. Пептиды 43
2.15. Статистический анализ 44
3. Результаты и обсуждение 45
3.1. Инкубация РВМС с белком врожденного иммунитета Tag7 приводит к формированию цитотоксических лимфоцитов 45
3.2. Инкубация Tag7 с РВМС приводит к формированию 3 цитотоксических субпопуляций лимфоцитов: NK (CD16+CD56+), CD3+CD4+, CD3+CD8+ 51
3.3. Сравнение действия Tag7, Tilorone и IL2 на формирование цитотоксических субпопуляций лимфоцитов 59
3.4. Tag7-активированные лимфоциты способны индуцировать 2 типа клеточной смерти: апоптоз и некроптоз 72
3.5. Определение минимальных структурных фрагментов белка врожденного иммунитета Tag7, необходимых для связывания и активации TREM1 79
Заключение 86
Выводы 89
Список используемой литературы 90
