Введение
Обзор литературы
Бактериофаг Pi -9-
Плазмида F - Ю -
Плазмида Ri -12 -
Плазмида RK2 -13 -
Внутриклеточная локализация плазмид -15-
Модель функционирования механизма сегрегационной стабильности..
Особенности генетической организации и устройства сегрегационной системы бактериофага N15 - 20 -
Цели и задачи работы -24 -
Задачи работы: - 24 -
Материалы и методы - 25 -
Среды, реактивы, ферменты и синтетические олигонуклеотиды - 25 -
Бактериальные штаммы, бактериофаги и плазмиды - 26 -
Плазмиды, используемые для экспрессии генов N15 - 26 -
Плазмиды и штаммы, используемые для экспериментов с репортерными геном при анализе транскрипции sop оперона N15 - 27 -
Плазмиды и штаммы, используемые для Northern-blot и primer extension анализа транскрипции sop оперона N15 -28-
Плазмиды, используемые в эксперименте по изучению регуляции экспрессии гена протеломеразы бактериофага N15 - 28 -
Плазмиды, используемые для определения скорости потери линейных репликонов N15 - 29 -
Плазмиды, используемые для определения внутриклеточной локализации линейных репликонов - 30 -
Трансформация E.coli -32-
Выделение плазмидной ДНК -32-
Электрофорез ДНК -32
Определение активности sop промотора -33"
Анализ транскриптов с помощью ОТ-ПЦР -33-
Определение активности Ptel промотора - зб -
Определение эффективности трансформации -Зб-
Флуоресцентная микроскопия -зб-
Определение скорости потери линейных плазмид -37-
Результаты - 39 -
Регуляция экспрессии sop оперона N15 - 39 -
Структура sop оперонаплазмиды N15 -39-
Связывание Sop белков N15 с sopPi промотором -41-
ОТ-ПЦР анализ транскриптов sop оперона N15 -48-
Структурная организация промоторной области гена протеломеразы - 51 -
Регуляция экспрессии промотора протеломеразы - 52 -
Роль протеломеразы в стабилизации концов линейной ДНК -54 -
Внутриклеточная локализация. Многокопийное состояние - 57 -
Внутриклеточная локализация. Однокопийное состояние - 62 -
Определение скорости потери линейных плазмид с разным количеством центромерных сайтов, основанных на репликоне N15 64-
Обсуждение -69-
Регуляция экспрессии sop оперона -70-
Внутриклеточная локализация плазмид -J2-
Роль числа и расположения центромер в эффективной работе механизма сегрегационной стабильности линейной плазмиды 75 -
Список публикаций по теме диссертации
