Введение
1. Введение 4
2. Цитолитические полипептиды актиний: структура, свойства, механизм действия 5
2.1. Кишечнополостные - богатый источник биологически активных полипептидов. Цитолизины актиний 5
2.2. Некоторые биологические аспекты в изучении цитолизинов актиний 8
2.3. Биохимические и функциональные характеристики цитолизинов актиний I-IV групп 10
2.3.1. Низкомолекулярные цитолизины актиний 10
2.3.2. Цитолизины актиний II группы. Актинопорины 12
2.3.2.1. Первичная структура актинопоринов 13
2.3.2.2. Пространственная структура актинопоринов 17
2.3.2.3. Взаимодействие актинопоринов с липидными мембранами 23
2.3.2.4. Молекулярный механизм порообразования 27
2.3.2.5. Фармакологические исследования актинопоринов 36
2.3.3. Цитолизины актиний III группы 39
2.3.4. Цитолизины актиний IV группы 40
2.4. Перспективы исследования цитолизинов актиний 41
3. Результаты и обсуждение 43
3.1. Выделение и некоторые физико-химические характеристики цитолизинов R. macrodactylus 44
3.2. Взаимодействие RTX-S II с липидами и бислойными липидными мембранами51
3.3. Установление первичной структуры актинопорина RTX-S II 55
3.3.1. Определение N-концевой аминокислотной последовательности 55
3.3.2. Определение нуклеотидной последовательности участка гена, кодирующего зрелый актинопорин 56
3.4. Исследование конформационной стабильности и гемолитической активности актинопорина RTX-S II 60
3.4.1. Исследование пространственной организации актинопорина RTX-S II 60
3.4.2. Исследование конформационных изменений в структуре актинопорина при действии различных факторов (температуры, рН среды, ионной силы раствора) 62
3.4.3. Исследование влияния различных факторов (температуры, рН среды, ионной силы раствора) на гемолитическую активность RTX-S II 72
3.5. Влияние RTX-S II на развитие ооцитов морского ежа Strongylocentrotus intermedius 76
3.6. Сравнительное изучение структуры комплексов актинопорина с G-актином и гельзолина с G-актином методами компьютерного моделирования 77
3.6.1. Построение модели пространственной структуры RTX-S II 78
3.6.2. Теоретическое предсказание структур комплексов актинопорин-актин в сравнении с комплексом актин-S 1 гельзолин 80
3.7. Исследование межмолекулярного взаимодействия RTX-S II и G-актина 83
4. Экспериментальная часть 90
4.1. Материалы 90
4.2. Методы 90
Выводы 102
