Введение
ГЛАВА 1. Обзор литературы 11
1.1. Фотодинамическая терапия 11
1.1.1. Молекулярные основы метода 11
1.1.2. Механизмы опухолевой деструкции 13
1.2. Фотосенсибилизаторы нового поколения 16
1.2.1. Производные природного бактериохлорофилла а 20
1.2.2. Синтетические тетрагидропорфирины
1.3. Препараты Tookad и Tookad Soluble 26
1.4. Системы солюбилизации и средства доставки фотосенсибилизаторов 29
ГЛАВА 2. Материалы и методы исследования 38
2.1. Изучаемые субстанции 38
2.2. Препараты и реактивы 39
2.3. Аппаратура 40
2.4. Биологические объекты
2.4.1. Клеточные культуры 42
2.4.2. Животные 43
2.4.3. Опухолевые модели 43
2.5. Методики исследований 44
2.5.1. Абсорбционная спектроскопия фотосенсибилизаторов 44
2.5.2. Измерение флуоресценции фотосенсибилизаторов в растворах методом локальной флуоресцентной спектроскопии 44
2.5.3. Оценка фотостабильности фотосенсибилизаторов в растворе 45
2.5.4. Изучение фото- и цитотоксичности фотосенсибилизаторов в системе in vitro 45
2.5.5. Изучение внутриклеточной локализации фотосенсибилизаторов методом КОМИРСИ 47
2.5.6. Оценка биораспределения фотосенсибилизаторов методом локальной флуоресцентной спектроскопии 48
2.5.7. Оценка биораспределения фотосенсибилизаторов методом оптического имиджинга 48
2.5.8. Методика проведения фотодинамической терапии на животных опухоленосителях 49
2.5.9. Оценка противоопухолевого эффекта 50
2.5.10. Оценка глубины проникновения светового луча в опухолевую ткань 51
2.5.11. Магнитно-резонансная томография 52
2.5.12. Гистологическое исследование 52
2.6. Статистические расчеты полученных результатов з
ГЛАВА 3. Результаты 53
3.1. Первичный скрининг субстанций-фотосенсибилизаторов 53
3.1.1. Фото-, физико-химические и биологические свойства субстанций-фотосенсибилизаторов бактериохлоринового ряда природного происхождения 54
3.1.2. Фото-, физико-химические и биологические свойства субстанций-фотосенсибилизаторов бактериохлоринового ряда синтетического происхождения. 67
3.2. Углубленное изучение отобранных субстанций-фотосенсибилизаторов 72
3.2.1. Углубленное изучение субстанции метиловый эфир О-пропилоксим-N пропоксибактериопурпуринимид 74
3.2.1.1. Фотоиндуцированная активность и цитотоксичность метилового эфира О пропилоксим-N-пропоксибактериопурпуринимида в системе in vitro 74
3.2.1.2. Накопление и распределение метилового эфира О-пропилоксим-N пропоксибактериопурпуринимида в клетках культуры саркомы S37 75
3.2.1.3. Распределение метилового эфира О-пропилоксим-N пропоксибактериопурпуринимида в тканях и органах животных-опухоленосителей 77
3.2.1.4. Фотоиндуцированная противоопухолевая активность метилового эфира О-пропилоксим-N-пропоксибактериопурпуринимида у мышей с опухолями различного гистогенеза 80
3.2.1.5. Фотоиндуцированная противоопухолевая активность метилового эфира О-пропилоксим-N-пропоксибактериопурпуринимида у крыс с холангиомой печени РС-1 82
3.2.2 Углубленное изучение субстанции мезо-тетра(3-пиридил)бактериохлорина 3.2.2.1. Фотоиндуцированная активность и цитотоксичность мезо-тетра(3-пиридил) бактериохлорина в системе in vitro 84
3.2.2.2. Распределение мезо-тетра(3-пиридил)бактериохлорина в тканях и органах животных-опухоленосителей
3.2.2.3. Фотоиндуцированная противоопухолевая активность мезо-тетра(3-пиридил)бактериохлорина у мышей с опухолями различного гистогенеза 89
3.2.2.4. Фотоиндуцированная противоопухолевая активность мезо-тетра(3-пиридил)бактериохлорина у крыс с холангиомой печени 93
3.2.3. Изучение препарата сравнения Радахлорин 94
3.2.3.1. Фотоиндуцированная активность и цитотоксичность радахлорина в системе in vitro 94
3.2.3.2. Распределение радахлорина в тканях и органах животных опухоленосителей 96
3.2.3.3. Фотоиндуцированная противоопухолевая активность радахлорина у мышей с опухолями различного гистогенеза 99
3.2.3.4. Фотоиндуцированная противоопухолевая активность радахлорина у крыс с холангиомой печени РС-1 103
3.3. Оценка глубины проникновения светового луча в опухолевую ткань 105
ГЛАВА 4. Обсуждение результатов 108
Выводы 118
Список литературы 121
