Введение
Глава 1. Острые лейкозы у детей первого года жизни (обзор литературы) 16
1.1. Злокачественные новообразования у детей первого года жизни 16
1.2. Пренатальное происхождение острых лейкозов у детей первого года жизни 17
1.3. Эпидемиология острых лейкозов у детей первого года жизни 20
1.4. Острый лимфобластный лейкоз у детей первого года жизни 21
1.4.1. Клинико-лабораторные показатели 21
1.4.2. Цитогенетические исследования 27
1.4.3. Иммунофенотипическая характеристика 29
1.4.4. Результаты терапии 32
1.5. Острый миелоидный лейкоз у детей первого года жизни 35
1.5.1. Клинико-лабораторные показатели 35
1.5.2. Цитогенетические исследования 38
1.5.3. Иммунофенотипическая характеристика 44
1.5.4. Результаты терапии 45
1.6. Структура и функции гена MLL 46
1.7. Перестройки гена MLL 53
1.7.1. Механизм действия химерных генов с участием MLL 53
1.7.2. Спектр перестроек 11q23/MLL 55
1.7.3. Прогностическое значение перестроек 11q23/MLL 75
1.7.4. Методы выявления перестроек 11q23/MLL 76
1.8. Прогностическое значение ответа опухолевых клеток на интенсивную химиотерапию. Определение минимальной остаточной болезни при остром лимфобластном лейкозе у детей первого года жизни 81
Глава 2. Материалы и методы 93
2.1. Характеристика пациентов 93
2.2. Методы обследования пациентов 97
2.2.1. Им мунофенотипирование 97
2.2.2. Цитогенетическое исследование 99
2.2.3. Флуоресцентная гибридизация in situ 100
2.2.4. Обратно-транскриптазная ПЦР 102
2.2.5. Секвенирование 106
2.2.6. Длинная инвертированная ПЦР 107
2.2.7. Определение минимальной остаточной болезни в кДНК методом ПЦР в режиме реального времени 107
2.2.8. Определение минимальной остаточной болезни путем выявления химерных генов с участием MLL в геномной ДНК методом ПЦР в режиме реального времени 109
2.3. Статистическая обработка полученных данных 120
Глава 3. Цитогенетические и молекулярно генетические характеристики острых лейкозов у детей первого года жизни 121
3.1. Цитогенетическая характеристика острого лимфобластного лейкоза 121
3.2. Перестройки 11q23/MLL при остром лимфобластном лейкозе 126
3.3. Цитогенетическая характеристика острого миелоидного лейкоза 135
3.4 Выявление транслокации t(7;12)(q36;p12) 141
3.5. Перестройки 11q23/MLL при остром миелоидном лейкозе 147
3.6. Цитогенетическая характеристика других вариантов острого лейкоза 158
3.7. Перестройки 11q23/MLL при других вариантах острого лейкоза 158
3.8. Использование метода флуоресцентной гибридизации in situ для выявления перестроек гена MLL 159
3.9. Структура химерных генов с участием MLL и ее взаимосвязь с клинико-лабораторными характеристиками острых лейкозов 172
Глава 4. Диагностика редких перестроек 11q23/mll при острых лейкозах у детей первого года жизни 184
4.1. Транслокация t(11;19)(q23;p13) / MLL-MYO1F 184
4.2. Транслокации t(2;11)(p21;q23) и t(X;11)(q24;q23) / MLL-SEPT6 188
4.3. Транслокация t(11;17)(q23;q25) / MLL-SEPT9 190
4.4. Частичный тандемный повтор в гене MLL (MLL-PTD) 190
4.5. Транслокация t(2;11)(q12;q23) / MLL-AFF3 192
4.6. Транслокация t(1;11)(p32;q23) / MLL-EPS15 195
4.7. Транслокация t(10;11)(p12;q23)/MLL-MLLT10 197
4.8. Транслокация t(1;11)(q21;q23) / MLL-MLLT11 198
Глава 5. Иммунофенотипическая характеристика острых лейкозов у детей первого года жизни 201
5.1. Иммунофенотипическая характеристика острого лимфобластного лейкоза 201
5.2. Иммунофенотипическая характеристика острого миелоидного лейкоза 204
5.3. Возможность использования экспрессии NG2 в качестве маркера для мониторинга минимальной остаточной болезни 205
Глава 6. Диагностика минимальной остаточной болезни 207
6.1. Определение минимальной остаточной болезни методом ПЦР в режиме реального времени у пациентов с наличием химерных гена и транскрипта MLL-EPS15 207
6.2. Сравнительный анализ результатов диагностики минимальной остаточной болезни методами проточной цитометрии и обратно-транскриптазной ПЦР у детей первого года жизни c острым лимфобластным лейкозом и перестройками 11q23/MLL 215
6.3. Прогностическое значение минимальной остаточной болезни в костном мозге, выявленной методами обратно-транскриптазной ПЦР и ПЦР в режиме реального времени, при остром лимфобластном лейкозе у детей первого года жизни, получающих лечение по протоколу MLL-Baby 217
6.4. Прогностическое значение минимальной остаточной болезни в периферической крови, выявленной методом ПЦР в режиме реального времени, при остром лимфобластном лейкозе у детей первого года жизни, получающих лечение по протоколу MLL-Baby 229
Заключение 237
Выводы 242
Практические рекомендации 244
Перспективы дальнейшей разработки темы 245
Список сокращений и условных обозначений 246
Список литературы 249
