Введение
Глава 1. Обзор литературы. Наследственный рак молочной железы 12
1.1. Механизм развития и клинико-морфологические характеристики наследственного РМЖ 12
1.2. Гены предрасположенности к РМЖ 14
1.2.1. BRCA1 и BRCA2 14
1.2.2. CHEK2 15
1.2.3. ТР53 17
1.2.4. PTEN 17
1.2.5. STK11 18
1.2.6. RAD51С 18
1.2.7. CDH1 19
1.2.8. PALB2 (FANCN) 19
1.2.9. ATM 21
1.2.10. BRIP1( FANCJ) 22
1.2.11. NBN 22
1.2.12. BLM 23
1.2.13. MLH1, MSH2 24
1.2.14. MUTYH 25
1.3. Секвенирование «нового поколения» (NGS) как метод диагностики наследственного РМЖ 25
1.3.1. Технологии NGS 26
1.3.2. Применение NGS для молекулярно-генетического обследования больных РМЖ 28
1.4. Применение результатов молекулярно-генетического исследования в клинической практике 32
1.4.1. Профилактика BRCA-ассоциированного РМЖ 32
1.4.2. Лечение BRCA-ассоциированного РМЖ 34
Глава 2. Материалы и методы 38
2.1. Алгоритм обследования и характеристика группы 38
2.2. Выделение геномной ДНК 41
2.3. Метод ПЦР в режиме реального времени 42
2.4. Метод секвенирования «нового поколения» (NGS) 42
2.5. Секвенирование по Сенгеру 48
2.6. Статистическая обработка результатов 49
Глава 3. Результаты и обсуждение 50
3.1. Анализ мутационного статуса генов предрасположенности к развитию онкологических заболеваний в группе больных РМЖ 50
3.1.1. BRCA-ассоциированный РМЖ 50
3.1.1.1. Анализ спектра и частоты распространенных в популяции мутаций в генах BRCA1/2 в группе больных РМЖ (метод ПЦР) 50
3.1.1.2. Анализ спектра и частоты редких мутаций в генах BRCA1/2 в группе больных РМЖ с клиническими признаками наследственного заболевания (метод NGS) 55
3.1.2. Анализ спектра и частоты мутаций в гене CHEK2 58
3.1.2.1. Анализ спектра и частоты распространенных в популяции мутаций в гене CHEK2 в группе больных РМЖ (методы ПЦР и NGS) 58
3.1.2.2. Анализ спектра и частоты редких мутаций в гене CHEK2 в группе больных РМЖ с клиническими признаками наследственного заболевания (метод NGS) 63
3.1.3. Анализ спектра и частоты мутаций в других генах предрасположенности к развитию онкологических заболеваний в группе больных РМЖ с клиническими признаками наследственного заболевания (метод NGS) 64
3.1.4. Двойная и тройная гетерозиготность по мутациям в генах предрасположенности к развитию РМЖ 70
3.2. Анализ мутационного статуса генов предрасположенности к развитию онкологических заболеваний в группе пациентов с доброкачественными новообразованиями и доброкачественной дисплазией молочной железы 71
3.2.1. Анализ спектра и частоты мутаций в генах BRCA1/2 в обследованной группе больных с доброкачественными новообразованиями и доброкачественной дисплазией молочной железы (методы ПЦР и NGS) 71
3.2.2. Анализ спектра и частоты мутаций в гене CHEK2 в обследованной группе пациентов с доброкачественными новообразованиями и доброкачественной дисплазией молочной железы (методы ПЦР и NGS) 75
3.2.3. Анализ спектра и частоты мутаций в других генах предрасположенности к развитию онкологических заболеваний в группе больных с доброкачественными новообразованиями и доброкачественной дисплазией молочной железы (метод NGS) 79
3.3. Оптимизация алгоритма молекулярно-генетического обследования больных РМЖ для выявления наследственного характера заболевания 81
Заключение 86
Выводы 94
Практические рекомендации 95
Список литературы 97
