Введение
Глава 1. Обзор литературы 13
1.1. Классификация опухолей системы крови 13
1.1.1. Миелоидные заболевания 14
1.1.2. Лимфоидные заболевания 17
1.2. Сигнальные пути в опухолях системы крови 19
1.2.1. Сигнальный путь WNT/-катенин 19
1.2.2. Сигнальный путь Hedgehog 22
1.2.3. Сигнальный путь Notch 24
1.2.4. Сигнальный путь TGF 27
1.2.5. Сигнальный путь PPAR 29
1.3 Семейство белков PARP как мишень в терапии опухолей системы крови 31
1.4. Низкомолекулярные ДНК-тропные соединения 33
1.4.1. Интеркалирующие соединения 34
1.4.2. Алкилирующие соединения 36
1.4.3. Узкобороздочные лиганды 38
1.4.4. Соединения со смешанным типом взаимодействия 40
Глава 2. Материалы и методы исследования 44
2.1. Список реактивов, использованных в работе 44
2.2. Приборы, использованные в работе 44
2.3. Линии опухолевых клеток 45
2.4. Определение цитотоксического эффекта 45
2.5. Определение уровня клеточной гибели по окрашиванию ДНК пропидий йодидом (PI) 47
2.6. Определение уровня апоптоза 47
2.7. Выделение РНК из опухолевых клеток 48
2.8. Условия проведения обратной транскрипции 48
2.9. ПЦР в реальном времени 48
2.10. Определение уровня активности PARP-1 49
2.11. Вестерн-блоттинг 49
2.12. Получение моноцитарной фракции клеток крови пациентов 50
2.13. Анализ эффективности совместного применения лекарственных препаратов 50
2.14. Оценка противоопухолевой активности кураксина CBL0137 и диминазена in vivo на модели мышиного острого миелодиного лейкоза WEHI- 3 51
2.15. Статистический анализ 52
Глава 3. Результаты исследования 53
3.1. Сравнительный анализ цитотоксической активности CBL0137 и диминазена на клетках опухолей системы крови in vitro и их противоопухолевой активности in vivo 53
3.1.1. Оценка цитотоксического эффекта ДНК-тропных молекул в отношении клеток опухолей системы крови 53
3.1.2. Оценка противоопухолевого эффекта негенотоксичных ДНК тропных малых молекул in vivo 57
3.2. Анализ биологических эффектов кураксина CBL0137 64
3.2.1. Анализ влияния кураксина CBL0137 на клеточный цикл 64
3.2.2. Оценка апоптогенной активности кураксина CBL0137 на клеточных линиях опухолей системы крови 67
3.2.3. Исследование влияния кураксина CBL0137 на экспрессию генов сигнальных путей 70
3.2.4. Исследование влияния на активность белка PARP-1 74
3.3. Анализ влияния кураксина CBL0137 на цитотоксические эффекты доксорубицина, даунорубицина и иматиниба 75
3.4. Оценка цитотоксического эффекта кураксина на клетки переживающих культур пациентов с опухолями системы крови 76
Глава 4. Обсуждение результатов 78
4.1. Сравнение противоопухолевой активности негенотоксичных ДНК тропных молекул 79
4.2. Влияние кураксина на апоптоз и клеточный цикл в клетках опухолей системы крови 80
4.3. Влияние кураксина на экспрессию кластеров генов таргетных путей 81
4.4. Ингибирующее действие кураксина на активность белка PARP-1 84
4.5. Кураксин CBL0137 потенцирует эффекты препаратов, применяемых в терапии опухолей ОСК 84
4.6. Кураксин CBL0137 демонстрирует цитотоксический эффект в отношении клеток переживающих культур, полученных от пациентов с опухолями системы крови 85
Заключение 86
Выводы 88
Список сокращений 90
Список литературы 92
