Введение
Глава 1. Аналитический обзор литературы 14
1.1 Очаговые повреждения головного мозга, патогенез, гистологические изменения в зоне повреждений 14
1.2 Подходы к лечению очаговых ушибов головного мозга 21
1.3 Экспериментальные модели очаговых ушибов головного мозга, критерии тяжести травмы, оценка двигательных и поведенческих нарушений 23
1.4 Стромальные и мезенхимальные клетки, генерируемые из костного мозга и липоаспирата в лечении тяжелых очаговых повреждений головного мозга у экспериментальных животных 32
1.4.1 Регенерация ЦНС как новая цель в лечении тяжелых очаговых повреждений головного мозга 32
1.4.2 Стромальные мезенхимальные клетки, генерируемые из костного мозга и липоаспирата, как будущее клеточной терапии очаговых повреждений головного мозга 33
1.4.3 Механизмы, лежащие в основе эффекта МСК 43
Глава 2. Материалы и методы 46
2.1 Объект исследования 46
2.1.1 Характеристика изучаемых групп 47
2.1.2 Моделирование тяжелого очагового повреждения головного мозга у экспериментальных животных 50
2.2 Оценка повреждений головного мозга, индуцированных очаговым повреждением 54
2.2.1 Оценка неврологического статуса животных 55
2.2.2 Оценка когнитивных функций 57
2.2.3 Оценка статической выносливости 58
2.3 Оценка функционального состояния головного мозга лабораторного животного 59
2.4 Генерация и оценка фенотипических и функциональных свойств мезенхимальных стромальных клеток (МСК) 60
2.4.1 Выделение МСК из костного мозга и жировой ткани (липоаспирата) 60
2.4.2 Определение числа клоногенных предшественников МСК 61
2.4.3 Оценка фенотипа МСК 61
2.4.4 Оценка иммуносупрессорной активности МСК 62
2.4.5 Оценка продукции цитокинов 62
2.5 Характеристика морфологических изменений головного мозга при тяжелом очаговом повреждении 63
2.6 Статистическая обработка экспериментальных данных 64
Глава 3. Результаты собственных экспериментальных исследований 66
3.1 Результаты моделирования очагового повреждения головного мозга 66
3.1.1 Характеристика общего состояния и неврологических нарушений при самопроизвольном восстановлении функций головного мозга животных 66
3.2 Результаты сравнительных характеристик МСК-КМ и МСК-ЛА 74
3.2.1 Сравнительная оценка клоногенности и пролиферативной активности МСК костного мозга и липоаспирата 76
3.2.2 Фенотип МСК костного мозга и липоаспирата 77
3.2.3 Иммуносупрессорная активность МСК костного мозга и липоаспирата 79
3.2.4 Секреторная активность МСК костного мозга и липоаспирата 80
3.3 Влияние МСК, генерированных из костного мозга (МСК-КМ) и липоаспирата (МСК-ЛА), на восстановление моторных и когнитивных функций в модели очагового повреждения головного мозга 84
3.3.1 Эффект трансплантации МСК-КМ и МСК-ЛА на восстановление моторных и когнитивных функций в модели очагового повреждения головного мозга 84
3.4 Исследование эффекта трансплантируемых клеток на динамику электрофизиологической активности мозга в модели тяжелого очагового повреждения 90
3.5 Морфологические изменения после трансплантации МСК в модели тяжелого очагового повреждения мозга 97
3.5.1 Модель очагового повреждения головного мозга (1-е сутки после травмы) 97
3.5.2 Морфологические изменения в модели тяжелого очагового повреждения головного мозга на 7 сутки после травмы без введения клеток 101
3.5.3 Морфологические изменения в модели тяжелого очагового повреждения головного мозга на 14 сутки после травмы без введения клеток 108
3.5.4 Морфологические изменения в модели тяжелого очагового повреждения головного мозга на 21 сутки после травмы без введения клеток 113
3.5.5 Особенности морфологической картины в модели очагового повреждения головного мозга на 7, 14, 21 сутки после трансплантации МСК в 1-е и 7-е сутки после ЧМТ 114
Заключение 122
Выводы 127
Практические рекомендации 129
Список сокращений 130
Список литературы 131
