Введение
1 Обзор литературы 10
1.1. Ответ микроорганизмов на стрессовые воздействия 10
1.1.1. Переход бактерий в пшомстаболическое состояние при стрессовых воздействиях ...11
1.1.2. Соединения группы алкилрезорцннов как аутоиндукторы покоящегося состояния бактерий 16
1.1.3. Процесс мутагенеза в покоящихся клетках 28
1.1.4. Жизнеспособность бактерий при стрессах 32
1.2. Плот постно-зависимые процессы у микроорганизмов и их регуляция 37
1.2.1. Регуляторные системы бактерий, чувствительные к изменению плотности популяции (кворум-эффект), и их сигнальные молекулы 38
1.2.1.1. Кворум-зависимые системы с участием ацилированных лактонов гомоссрина 39
1.2.1.2. Кворум-зависимые процессы с участием пептидных сигнальных агентов 41
1.2.1.3. Кворум-зависимые процессы с участием факторов аминокислотной природы 42
1.2.1.4. Кворум-зависимые процессы с участием иных сигнальных молекул 44
Экспериментальная часть 48
2. Материалы и методы исследований 48
2.1. Используемые в экспериментальной работе материалы 48
2.1.1. Регуляторные факторы микроорганизмов 48
2.1.2. Бактериальные штаммы 50
2.1.3. Иные материалы, используемые в работе 50
2.2. Химические методы анализа 51
2,2,1. Количественное определение алкилрезорцннов 51
2.3. Микробиологические методы анализа..,. 51
2.3.1. Оценка жизнеспособности бактерий при длительном инкубировании и голодании 51
2.3.1.1.Тест Kogure для определения числа жизнеспособных, но некультивируемых клеток 52
2.3.2. Оценка токсических эффектов гексилрезорцина при краткосрочном культивировании бактерий на богатой питательной среде и в условиях голодания 53
2.3.3. Изменение вирулентности S. aureus под действием теплового шока в присутствии гексилрезорцина 53
2.3.4. Индукция образования R-форм у бактерий под действием исследуемых факторов 54
2.3.4.1. Тест на определение изменения устойчивости S- и R-форм S. typhhnurhun ТА100 к сальмонеллезному бактериофагу 54
2.3.4.2. Определение сохранения плазмиды у S- и R-форм S. typhimurium ТА100 при действии гексилрезорцина 55
2.3.4.3. Определение динамики роста S- и R-форм S. typhimurium ТЛ100 при
действии гексилрезорцина 55
2.4. Методы биотсстирования 56
2.4,1. Опенка токсического действия исследуемых соединений по отношению к тсстерным микроорганизмам 56
2.4.2. Тестирование на мутагенность в бактериальных тест-системах 56
2.4.2.1. Тест Эймса на выявление генных мутаций без метаболической активации.. 57
2.4.2.2. Тест на прямое повреждение бактериальной ДНК 57
2.4.2.3. SOS-хромотест 58
2.4.3. Тестирование па генотоксичность in vivo 59
2.4.3.1. Тест на индукцию микроядер в эритроцитах периферической крови мышей ш vivo 59
2.5. Статистическая обработка результатов 60
3. Результаты и обсуждение 61
3.1. Токсические и генотоксические эффекты микробных регуляторов 61
3.1.1. Токсические эффекты исследуемых факторов 61
3.1.2. Способность микробных регуляторов к индукции мутаций 61
3.1.3. ДНК-повреждающая активность микробных регуляторов роста 62
3.1.4. SOS-индуцирующая способность исследуемых соединений 63
3.1.5. Индукция микроядер в эритроцитах периферической крови мышей 67
3.2. Изменение физиологической активности бактерий при длительном инкубировании и голодании 71
3.3. Токсические эффекты гексил резорцина при краткосрочном культивировании бактерий на богатой питательной среде и в условиях голодания 81
3.4. Изменение вирулентности S. aureus под действием теплового шока в присутствии гексилрезорцина и без него 83
3.5. Индукция образования R-форм у бактерий под действием исследуемых факторов , 86
3.6. Изменение устойчивости S- и R-форм S, typhimurium ТЛЇ00 к сальмонеллезному бактериофагу 91
3.7. Сохранение плазмиды у S- и R-форм S. typhimurium ТА100 при действии гексилрезорцина 92
3.8. Особенности роста S- и R- форм S. typhimurium в присутствии гексилрезорцина 93
Заключение 97
Выводы 103
Список литературы 105
