Введение
ГЛАВА 1. Обзор литературы .25
1.1 Предисловие .25
1.2 Физиологические особенности и питательные потребности Yersinia pestis 26
1.3 Физиологические особенности и питательные потребности Vibrio сholerae 31
1.4 Использование различных видов сырья для изготовления основ микробиологических питательных сред
1.4.1 Общие положения 43
1.4.2 Питательные среды на основе гидролизатов белков животного происхождения
1.4.2.1 Использование гидролизатов белков животного происхождения для выращивания чумного микроба 46
1.4.2.2 Использование гидролизатов белков животного происхождения для выращивания холерного вибриона 47
1.4.3 Питательные среды на основе гидролизатов белков растительного происхождения .48
1.4.3.1 Общие положения 48
1.4.3.2 Использование гидролизатов белков растительного происхождения для выращивания чумного микроба 49
1.4.3.3 Использование гидролизатов белков растительного происхождения для выращивания холерного вибриона 50
1.4.4 Использование различных препаратов из микроорганизмов в качестве основ для питательных сред 51
1.4.4.1 Общие положения .51
1.4.4.2 Белковые основы питательных сред из дрожжей Saccharomyces cerevisiae 54
1.4.4.3 Использование препаратов из биомассы микроорганизмов для выращивания чумного микроба 59
1.4.4.4 Использование препаратов из биомассы микроорганизмов для выращивания холерного вибриона 60
1.4.4.5 Перспективы использования дрожжей Saccharomyces cerevisiae в качестве сырья для приготовления основ микробиологических питательных сред 61
ГЛАВА 2. Материалы и методы 64
2.1 Штаммы микроорганизмов 64
2.2 Питательные среды 67
2.2.1 Сконструированные питательные среды 67
2.2.1.1 Агаризованная питательная среда на основе панкреатического перевара пекарских дрожжей для культивирования и выделения чумного микроба при 28С 67
2.2.1.2 Агаризованная питательная среда на основе панкреатического перевара пекарских дрожжей для культивирования чумного микроба при 37С 2.2.1.3 Щелочной агар - агаризованная питательная среда на основе панкреатического перевара пекарских дрожжей для культивирования и выделения холерного вибриона 68
2.2.1.4 Жидкая накопительная питательная среда на основе панкреатического перевара пекарских дрожжей для культивирования и выделения холерного вибриона 68
2.2.1.5 Бульон для культивирования холерного вибриона на основе панкреатического перевара пекарских дрожжей 68
2.2.1.6 Питательная среда на основе панкреатического перевара пекарских дрожжей для идентификации холерного вибриона по признаку ферментации глюкозы в аэробных и анаэробных условиях 69
2.2.1.7 Питательная среда на основе панкреатического перевара пекарских дрожжей для идентификации холерного вибриона по признаку ферментации аминокислот .69
2.2.1.8 Глюкозо-лактозная агаризованная питательная среда на основе панкреатического перевара пекарских дрожжей для идентификации холерного вибриона на этапе отбора подозрительных
колоний 70 2.2.2 Контрольные питательные среды .70
2.2.2.1 Контрольные коммерческие питательные среды 70
2.2.2.2 Контрольные питательные среды лабораторного изготовления 71
2.3 Белковые гидролизаты 73
2.3.1 Коммерческие белковые гидролизаты 73
2.3.2 Белковые гидролизаты лабораторного изготовления
2.4 Дрожжи хлебопекарные прессованные 74
2.5 Методы исследования .74
2.5.1 Физико-химические методы исследования 74
2.5.1.1 Метод определения рН 74
2.5.1.2 Метод определения общего азота .74
2.5.1.3 Метод определения аминного азота .75
2.5.1.4 Метод определения содержания хлоридов .75
2.5.1.5 Метод определения содержания углеводов 75
2.5.1.6 Метод определения прочности агарового студня по Валенту .76
2.5.2 Микробиологические методы исследования 76
2.5.2.1 Подготовка тест-штаммов для определения биологических показателей питательных сред .76
2.5.2.2 Подготовка других штаммов микроорганизмов 76
2.5.2.3 Определение биологических показателей питательных сред .76
2.5.2.3.1 Определение показателя чувствительности 76
2.5.2.3.2 Определение показателя скорости роста микроорганизмов на питательных средах 77
2.5.2.3.3 Определение показателя прорастания питательных сред 77
2.5.2.3.4 Определение показателя числа колоний, выросших при посеве шестичасовых бульонных культур на агаровые пластинки 77
2.5.2.3.5 Определение показателя стабильности основных свойств микроорганизмов 78
2.5.2.3.6 Определение показателя эффективности питательных сред .78
2.5.2.3.7 Определение дифференцирующих свойств питательных сред 78
2.5.2.3.8 Определение диаметра колоний и радиальной скорости роста 78
2.5.2.4 Определение гемолитической активности штаммов холерного вибриона 79
2.5.2.5 Получение супернатантов бульонных культур холерного вибриона
2.5.3 Биологические и цитологические методы исследования 79
2.5.4 Серологические методы исследования 79
2.5.5 Методы статистической обработки полученных результатов .79
ГЛАВА 3. Оптимизация технологического процесса изготовления питательной основы – панкреатического перевара пекарских дрожжей (ПППД) .81
3.1. Исследование различных марок дрожжей хлебопекарных прессованных в аспекте их использования в качестве питательного субстрата для панкреатического гидролиза 81
3.2 Определение оптимальной для проведения панкреатического гидролиза плотности суспензии прессованных пекарских дрожжей в очищенной воде 90
3.3 Сравнительное изучение различных методов ингибирования собственных дрожжевых ферментов в гидролизуемых смесях при проведении панкреатического переваривания прессованных пекарских дрожжей 93
3.4 Подбор дозы панкреатина сухого, обеспечивающей оптимальный гидролиз прессованных пекарских дрожжей 97
3.5 Поиск оптимума рН для проведения панкреатического гидролиза прессованных пекарских дрожжей .101
3.6 Оптимизация температурного режима панкреатического гидролиза суспензии прессованных пекарских дрожжей .105
3.7 Сравнительное изучение эффективности методов осветления панкреатического перевара пекарских дрожжей .105
3.8 Результаты оптимизации технологического процесса изготовления панкреатического перевара пекарских дрожжей (ПППД) .108
3.9 Характеристика конечного продукта технологического процесса – панкреатического перевара пекарских дрожжей (ПППД) .
3.9.1 Физико-химические показатели .111
3.9.2 Биологические свойства препарата 111
ГЛАВА 4. Сравнительная оценка панкреатического перевара пекарских дрожжей и других белковых гидролизатов, используемых в качестве основ микробиологических питательных сред 114
4.1 Подбор белковых гидролизатов для сравнительной оценки панкреатическим переваром пекарских дрожжей. Метод сравнения, критерии оценки 114
4.2 Результаты сравнительной оценки панкреатического перевара пекарских дрожжей и других белковых гидролизатов в отношении тест-штаммов холерного вибриона и чумного микроба 116
4.3 Анализ результатов сравнительного тестирования панкреатического перевара пекарских дрожжей и других белковых гидролизатов в аспекте создания на их основе универсальной питательной среды для холерного
вибриона и чумного микроба 118
ГЛАВА 5. Изучение возможности создания на основе панкреатического перевара пекарских дрожжей агаризованных питательных сред для культивирования чумного микроба при 28С и 37С 121
5.1 Агаризованная питательная среда на основе панкреатического перевара пекарских дрожжей для культивирования и выделения чумного микроба при 28С 121
5.1.1 Состав разработанной на основе панкреатического перевара пекарских дрожжей агаризованной питательной среды для культивирования и выделения чумного микроба при 28С 121
5.1.2 Сравнительное изучение разработанной на основе панкреатического перевара пекарских дрожжей агаризованной питательной среды для культивирования и выделения чумного микроба при 28С и контрольных сред по основным биологическим показателям 121
5.2 Агаризованная питательная среда основе панкреатического перевара
пекарских дрожжей для культивирования чумного микроба
при 37С 124
5.2.1 Теоретическое и практическое обоснование необходимости
и возможности создания на основе панкреатического перевара пекарских
дрожжей агаризованной питательной среды для культивирования чумного
микроба при 37С 124
5.2.2 Состав разработанной на основе панкреатического перевара пекарских дрожжей агаризованной питательной среды для культивирования чумного микроба при 37С 126
5.2.3 Сравнительное изучение разработанной на основе панкреатического перевара пекарских дрожжей агаризованной питательной среды для культивирования чумного микроба при 37С и контрольных сред по
основным биологическим показателям 126
5.3 Апробация разработанных на основе панкреатического перевара пекарских дрожжей питательных сред для чумного микроба в ходе
тактико-специального учения СПЭБ 132
ГЛАВА 6. Изучение возможности создания комплекса питательных сред для культивирования, выделения и идентификации холерного вибриона на основе панкреатического перевара пекарских дрожжей 137
6.1 Теоретическое и практическое обоснование необходимости и возможности создания на основе панкреатического перевара пекарских дрожжей комплекса питательных сред для культивирования, выделения и идентификации холерного вибриона 137
6.2 Щелочной агар на основе панкреатического перевара пекарских дрожжей 140
6.3 Жидкая накопительная питательная среда на основе панкреатического перевара пекарских дрожжей 143
6.4 Результаты использования разработанного комплекса сред «Щелочной агар - Жидкая накопительная среда» на основе панкреатического перевара пекарских дрожжей при мониторинге объектов окружающей среды на наличие холерного вибриона и исследовании материала от людей 146
6.5 Бульон для культивирования холерного вибриона на основе панкреатического перевара пекарских дрожжей 151
6.6 Питательная среда на основе панкреатического перевара пекарских дрожжей для идентификации холерного вибриона по признаку ферментации глюкозы в аэробных и анаэробных условиях 156
6.7 Питательная среда на основе панкреатического перевара пекарских дрожжей для идентификации холерного вибриона по признаку ферментации аминокислот 168
6.8 Глюкозо-лактозная агаризованная питательная среда на основе панкреатического перевара пекарских дрожжей для идентификации холерного вибриона на этапе отбора подозрительных колоний 183
6.9 Результаты апробации разработанного на основе панкреатического перевара пекарских дрожжей комплекса питательных сред для культивирования, выделения и идентификации холерного вибриона в ходе тактико-специального учения СПЭБ .204
Заключение 209
Выводы 238
Перечень сокращений, условных обозначений, символов и терминов 240 список литературы .
