Введение
ГЛАВА 1. Оценка транскрипционного профиля в кумулюсных клетках как метод диагностики качества ооцитов и эмбрионов и прогнозирования результатов программ вспомогательных репродуктивных технологий (обзор литературы) 13
1.1 Взаимодействие между ооцитом и стромальными клетками в фолликуле 14
1.2 Гены внеклеточного матрикса и их роль в регуляции женской репродуктивной системы
1.2.1 Ген гиалуронан - синтаза 2 (HAS2) 17
1.2.2 Ген версикан (VCAN) 19
1.2.3 Молекула клеточной адгезии активированных лейкоцитов (ALCAM) .21
1.2.4 Инсулиноподобный фактор роста 1 (IGF1) 22
1.3 Гены, регулирующие передачу внутриклеточной информации, и их роль в регуляции женской репродуктивной системы 25
1.3.1 Ген простагландин-синтаза 2 (PTGS2) 25
1.3.2 Ган гремлин (GREM1) 28
1.3.3 Ген амфирегулин (AREG) 30
1.4 Гены, стабилизирующие мембраны клеток, и их роль в регуляции женской репродуктивной системы 32
1.4.1 Ген инозитол 1,4,5-трифосфат 3-киназа А (ITPKA) 32
1.4.2 Ген кальмодулин (CALM2) .35
1.4.3 Временный рецептор потенциал-зависимых катионных каналов седьмой в подсемействе М (TRPM7) 36
1.5 Ген, регулирующий убиквитинирование – супрессор цитокиновой сигнализации, содержащий SPRY-домен (SPSB2) и ген, регулирующий клеточный цикл – p53 индуцируемый опухолевый белок 3 (TP53I3), и их роль в регуляции женской репродуктивной системы 38
1.6 Ген, регулирующий метаболизм клеток – тромбоцитарная фосфофруктокиназа (PFKP), его роль в регуляции женской репродуктивной системы .41
ГЛАВА 2. Материалы и методы исследования 45
2.1. Материал исследования 45
2.2. Дизайн исследования 46
2.3. Методы исследования
2.3.1 Общеклинические методы исследования 51
2.3.2 Гормональное исследование 52
2.3.3 Ультразвуковое исследование органов малого таза 53
2.3.4 Спермиологическое исследование эякулята 54
2.3.5 Специальные методы исследования 55
2.3.6 Протокол стимуляции функции яичников 56
2.3.7 Трансвагинальная пункция яичников 57
2.3.8 Метод оплодотворения и культивирования дробящихся эмбрионов in vitro 58
2.3.9 Предимплантационный генетический скрининг 2.3.10 Перенос эмбрионов в полость матки 60
2.3.11 Поддержка лютеиновой фазы и посттрансферного периода 61
2.3.12 Диагностика наступления беременности 61
2.3.13 Статистический анализ полученных данных 61
ГЛАВА 3. Результаты исследований 63
3.1. Клинико-анамнестическая характеристика включенных в исследование пациенток 63
3.1.1. Возрастная характеристика пациенток 63
3.1.2. Антропометрическая характеристика пациенток .64
3.1.3. Характеристика менструальной функции женщин 66
3.1.4. Репродуктивный анамнез пациенток .68
3.1.5. Характеристика женщин по перенесенным гинекологическим заболеваниям и оперативным вмешательствам 74
3.1.6. Гормональный профиль пациенток, включенных в исследование 80
3.2. Особенности лечения в программе ЭКО у женщин в исследуемых группах .83
3.2.1. Особенности стимуляции суперовуляции, фолликуло- и оогенеза у пациенток в исследуемых группах 83
3.2.2. Характеристика эмбриогенеза у пациенток в исследуемых группах 86
3.2.3. Особенности стимуляции суперовуляции, фолликуло-, оогенеза и эмбриогенеза у пациенток, проходивших программу ЭКО/ИКСИ + ПГС 90
3.3. Анализ уровня экспрессии мРНК генов в кумулюсных клетках включенных в исследование пациенток 92
3.3.1. Ассоциация уровня экспрессии мРНК генов в кумулюсных клетках с вероятностью наступления беременности 92
3.3.2. Ассоциация уровня экспрессии мРНК генов в кумулюсных клетках с вероятностью наличия хромосомных аномалий в эмбрионах 95
3.3.3. Ассоциация уровня экспрессии мРНК генов в кумулюсных клетках с наличием дисморфизмов ооцитов и качеством развивающихся эмбрионов 98
3.4. Клинико-экономический анализ эффективности оценки уровня экспрессии мРНК в кумулюсных клетках для предикции получения эуплоидных эмбрионов удовлетворительного и плохого качества 103
ГЛАВА 4. Обсуждение результатов 107
Заключение 124
Выводы 126
Практические рекомендации
