ВВЕДЕНИЕ...................................................................................................................... 5
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ................................................................................ 13
1.1 Общая характеристика аритмий .................................................................. 13
1.2 Фармакотерапия аритмий............................................................................. 17
1.3 Препараты лаппаконитина гидробромида.................................................. 20
1.3.1 Доклинические исследования препаратов лаппаконитина...................... 24
1.3.1.1 Изучение острой и хронической токсичности ................................... 24
1.3.1.2 Изучение биодоступности.................................................................... 25
1.3.2 Клинические исследования препаратов лаппаконитина.......................... 26
1.3.3 Литературный обзор биоаналитических методик определения
лаппаконитина и N-дезацетиллаппаконитина...................................................... 27
ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ 1 ............................................................................................ 28
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ...................................... 30
2.1 Материалы исследования ............................................................................. 30
2.1.1 Стандартные растворы ................................................................................ 30
2.1.2 Образцы биологической матрицы.............................................................. 31
2.1.3 Элюенты........................................................................................................ 32
2.1.4 Оборудование, используемое для хроматографического разделения и
детектирования........................................................................................................ 33
2.1.5 Программное обеспечение, используемое для обработки полученных
результатов............................................................................................................... 33
2.2 Методы исследования................................................................................... 34
2.2.1 Приготовление стандартных растворов..................................................... 34
2.2.2 Пробоподготовка биологических образцов............................................... 37
2.2.3 Условия хроматографического разделения и детектирования ................ 40
2.2.4 Приготовление элюентов............................................................................. 41
2.2.5 Фармакокинетический анализ полученных результатов.......................... 41
ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ 2 ............................................................................................ 423
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЯ.............................................................. 44
3.1 Разработка методики..................................................................................... 44
3.1.1 Подбор внутреннего стандарта................................................................... 44
3.1.2 Разработка условий масс-спектрометрического детектирования ........... 44
3.1.3 Разработка условий хроматографического разделения............................ 50
3.1.4 Выбор аналитических диапазонов методики ............................................ 52
3.2 Валидация методики..................................................................................... 53
3.2.1 Валидация методики, плазма крови человека, этап 1............................... 55
3.2.1.1 Градуировочная кривая......................................................................... 55
3.2.1.2 Селективность ....................................................................................... 60
3.2.1.3 Точность и прецизионность ................................................................. 63
3.2.1.4 Эффект матрицы.................................................................................... 63
3.2.1.5 Степень извлечения............................................................................... 74
3.2.1.6 Перенос пробы....................................................................................... 79
3.2.2 Валидация методики, цельная кровь человека, этап 1 ............................. 79
3.2.2.1 Градуировочная кривая......................................................................... 79
3.2.2.2 Селективность ....................................................................................... 84
3.2.2.3 Точность и прецизионность ................................................................. 86
3.2.2.4 Эффект матрицы.................................................................................... 86
3.2.2.5 Степень извлечения............................................................................... 91
3.2.2.6 Перенос пробы....................................................................................... 93
3.2.3 Выбор биологической матрицы для последующего анализа .................. 93
3.2.4 Валидация методики, плазма крови человека, этап 2............................... 96
3.2.4.1 Градуировочная кривая......................................................................... 96
3.2.4.2 Точность и прецизионность ................................................................. 98
3.2.4.3 Стабильность ......................................................................................... 99
3.2.4.4 Отсутствие влияния разбавления образцов...................................... 102
3.3 Аналитический этап исследования ........................................................... 104
3.4 Фармакокинетический этап исследования ............................................... 114
ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ 3 .......................................................................................... 1194
ЗАКЛЮЧЕНИЕ ........................................................................................................... 120
СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ И УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ
....................................................................................................................................... 122
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ ........................................................................................... 124
ПРИЛОЖЕНИЕ ........................................................................................................... 141
