Введение
Глава 1. Фиброин шелка как перспективный материал для тканевой инженерии и регенеративной медицины (обзор литературы) 12
1.1. Биосовместимые материалы 12
1.2. Структура и свойства фиброина шелка 13
1.3. Области применения изделий из фиброина шелка 17
1.3.1. Тканевая инженерия 17
1.3.1.1. Регенерация кожи 17
1.3.1.2. Костно-хрящевая инженерия 19
1.3.1.3. Биоинженерия печени 21
1.3.1.4. Глазная хирургия 23
1.3.1.5. Сосудистая инженерия 24
1.3.1.6. Нейроинженерия 25
1.3.1.7. Мирингопластика 27
1.3.1.8. Восстановление соединительной ткани 28
1.3.1.9. Восстановление межпозвоночных дисков 29
1.3.2. Другие области применения фиброина шелка 29
1.4. Структура и свойства коллагена и желатина 31
1.5. Структура и свойства рекомбинантных спидроинов 38
Глава 2. Материалы и методы 42
2.1. Материалы 42
2.2. Экспериментальные животные 43
2.3. Клеточные линии 44
2.4. Методы 44
2.4.1. Получение фиброина шелка 44
2.4.3. Получение водного раствора коллагена 45
2.4.4. Получение раствора фиброина шелка в муравьиной кислоте 46
2.4.5. Изготовление пленок из фиброина шелка и коллагена 46
2.4.6. Получение раствора фиброина шелка в 1,1,1,3,3,3 гексафторпропаноле-2 46
2.4.7. Получение растворов рекомбинантных спидроинов в 1,1,1,3,3,3 гексафторпропаноле-2 47
2.4.8. Получение раствора желатина в 1,1,1,3,3,3-гексафторпропаноле-2 47
2.4.9. Изготовление микроволокнистых скаффолдов на основе фиброина шелка 47
2.4.10. Анализ поверхностной структуры пленок и микроволокнистых скаффолдов методом сканирующей электронной микроскопии 48
2.4.11. Анализ структуры пленок и микроволокнистых скаффолдов методом сканирующей зондовой нанотомографии 49
2.4.12. Изучение структуры пленок методом атомно-силовой микроскопии 50
2.4.13. Изучение деградации пленок на основе фиброина шелка in vitro 51
2.4.14. Изучение механических свойств пленок из фиброина шелка 51
2.4.15. Анализ цитотоксичности пленок и микроволокнистых скаффолдов 52
2.4.16. Анализ пролиферативной активности клеток на пленках различного состава 52
2.4.17. Анализ адгезии и пролиферации клеток на микроволокнистых скаффолдах 53
2.4.18. Исследование заживления полнослойной кожной раны крысы породы Wistar 55
2.4.19. Гистологические исследования 58
2.4.20. Статистическая обработка результатов 58
Глава 3. Результаты 59
3.1. Получение образцов пленок и микроволокнистых скаффолдов для исследований 59
3.2. Анализ структуры полученных пленок и микроволокнистых скаффолдов 63
3.3 Исследование деградации пленок на основе фиброина шелка in vitro 76
1.4. Исследование механических свойств пленок на основе фиброина шелка 79
1.5. Анализ цитотоксичности полученных пленок и микроволокнистых скаффолдов 82
1.6. Анализ биосовместимости полученных пленок и микроволокнистых скаффолдов 83
1.6.1.Изучение адгезии и пролиферативной активности клеток на полученных пленках и микроволокнистых скаффолдах 83
1.6.2. Исследование заживления полнослойной кожной раны крыс породы Wistar с помощью полученных пленок и микроволокнистых скаффолдов . 89
Глава 4. Обсуждение 95
Выводы 109
Список сокращений 111
Список литературы 112
