Введение
1. Обзор литературы 10
1.1. Вирус папилломы человека 10
1.2. Структура, функции и свойства онкобелков е7 15
1.3. Структура, функции и свойства белков теплового шока 21
1.4. Литературная справка по белкам е7-бтш70 27
2. Собственные исследования 34
2.1. Материалы и методы исследований 34
2.1.1. Используемые штаммы 34
2.1.2. Растворы, реактивы 34
2.1.3. Хроматографическая очистка 39
2.1.4. Методы контроля качества 42
2.2. Результаты исследований 47
2.2.1. Разработка технологии очистки гибридных белков 47
2.2.1.1. Изучение примесного профиля е7-бтш70, стратегия хроматографической очистки и стабилизации белков в растворе 47
2.2.1.2. Металл-хелат аффинная хроматография как стадия «захвата» гибридных белков из клеточного лизата 53
2.2.1.3. Анионообменная хроматография как стадия «тонкой» очистки е7-бтш70 58
2.2.1.4. Концентрирование и перевод гибридных белков в буфер афи 62
2.2.2. Активная фармацевтическая субстанция 64
2.2.2.1. Фармацевтическая разработка афи 64
2.2.2.2. Контроль афи – спецификация, аналитические методики, валидация, анализы серий 75
2.2.2.3. Выбор первичной упаковки афи 76
2.2.2.4. Исследование стабильности афи 79
2.2.3. Готовая лекарственная форма 81
2.2.3.1. Фармацевтическая разработка глф 81
2.2.3.2. Вспомогательные вещества 86
2.2.3.3. Описание производственного процесса ГЛФ 92
2.2.3.4. Контроль глф – спецификация, аналитические методики 95
2.2.3.5. Выбор первичной упаковки глф 96
2.2.3.6. Исследования стабильности глф 100
2.2.4. Расчёт экономической эффективности производства 104
3. Обсуждение полученных результатов 111
4. Выводы 116
5. Практическое использование полученных результатов 117
6. Рекомендации по использованию научных выводов 118
7. Список использованной литературы 119
