Введение
Глава 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР 9
1.1. Поступление и распределение нефтепродуктов в водных объектах 9
1.2. Процессы самоочищения водных масс от нефтепродуктов 11
1.2.1. Биологическое самоочищение водных масс 14
1.2.2. Интенсификация процессов самоочищения водным 16 гидробионтом
1.3. Распространенность и некоторые особенности углеводородокисляющих микроорганизмов 21
1.3.2. Пути поступления углеводородов в клетку 23
1.3.3. Влияние некоторых небиологических факторов на степень деградации нефти 24
1.4. Иммобилизованные клетки микроорганизмов 28
1.4.1. Иммобилизация в Са-альгинатный гель 30
1.5. Опыт создания и применения биопрепаратов в России и странах СНГ 33
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Объекты исследования 37
2.2. Выделение и идентификация углеводородокисляющих микроорганизмов
2.2.1. Морфологические исследования 37
2.3. Культивирование микроорганизмов 38
2.4. Определение количества микроорганизмов 38
2.5. Иммобилизация микроорганизмов 39
2.6. Исследования деструкции нефти 40
2.6.1. Определение содержания остаточных нефтепродуктов 41
42 Глава 3. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
3.1. Применение альгината натрия для иммобилизации микроорганизмов - нефтедеструкторов
3.1.1. Иммобилизация бактериальных клеток в Са-альгинатных гранулах
3.1.2. Ассимиляция нефти иммобилизованными и свободными клетками Acinetobacter valentis в периодических условиях
3.1.3. Ассимиляция нефти иммобилизованными и свободными клетками Acinetobacter calcoaceticuss в периодических условиях
3.2. Разработка методики создания Са-альгинатных гранул, обладающих положительной плавучестью
3.2.1. Использование различных концентраций альгината натрия для получения плавающих Са-альгинатных гранул
3.2.2. Применение веществ с малой плотностью для придания Са-альгинатным гранулам положительной плавучести
3.3. Иммобилизация клеток нефтедеструкторов Acinetobacter valentis в гранулы Са-альгинатного геля, обладающих положительной плавучестью
3.3.1. Биодеструкция пленочной нефти иммобилизованными клетками Acinetobacter valentis
3.4. Исследования параметров, влияющих на свойства препарата 58
3.4.1. Влияние размера Са-альгинатных гранул на скорость биодеструкции нефти
3.4.2. Влияние концентрации иммобилизованных клеток на скорость биодеструкции нефти
3.4.3. Влияние биогенных элементов на скорость биодеструкции 68 нефти
3.4.4. Исследования возможности биоразложения Са-альгинатных гранул 74
3.5. Хранение полученного препарата 75
3.6. Механизм действия препарата 78
3.6.1. Рост и размножение микроорганизмов-нефтедеструкторов в Са-альгинатных гранулах 78
3.6.2. Механизм биодеструкции пленочной нефти препаратом 81
3.6.3. Распределение клеток по глубине 84
3.7. Применение препарата 85
3.7.1. Влияние количества вносимого препарата на процесс биодеструкции 85
3.7.2. Влияние толщины нефтяной пленки на динамику биодеструкции нефти 88
3.7.3. Исследование динамики биодеструкции различных нефтей 92
3.8. Натурные испытания 93
3.9. Использование препарата для биоремедиации морской воды 95
3.9.1. Выделение и отбор галотолерантных штаммов микроорга-низмов-нефтедеструкторов 95
3.9.2. Деструкция нефти в морской воде галотолерантными штаммами 98
3.9.3. Биодеструкция нефти в морской воде ассоциациями микроорганизмов 100
3.9.4. Биодеструкция пленочной нефти в морской воде иммобилизованной ассоциациями микроорганизмов 103
3.9.5. Рост и размножение клеток дрожжей Yarrowia lipolytica в Са-альгинатных гранулах 106 3. 10. Микроводоросли 109
3.10.1. Культивирование микроводорослей Platymonas viridis и Dunaliella tertiolecta на средах, содержащих нефть 111
3.10.2. Исследование влияния на жизнедеятельность микроводорослей наличия сплошной нефтяной пленки 116
3.10.3. Влияние различных фракций нефти на скорость роста микроводорослей Platymonas viridis 123
3.11. Иммобилизация микроводорослей 125
3.12. Биодеструкция нефтяной пленки препаратом с совместно иммобилизованными микроорганизмами и микроводорослям 128
Выводы 132
Список использованной литературы 133
Приложения
