Введение
Глава 1 Обзор литературы 11
1.1 Молекулярно-клеточные механизмы окислительного стресса 11
1.2 Молекулярно-клеточные механизмы патогенеза гонартроза 26
1.3 Полиморфные варианты генов и предрасположенность к развитию артроза
Глава 2 Материалы и методы исследования 45
2.1 Клинические наблюдения и клинические группы 45
2.2 Получение биологического материала 46
2.3 Биохимические методы исследования 47
2.3.1 Определение содержания продуктов ПОЛ, реагирующих с тиобарбитуровой кислотой
2.3.2 Определение активности супероксиддисмутазы/супероксидустраняющей активности
2.3.3 Определение активности каталазы/скорости утилизации гидропероксида. 49
2.3.4 Определение активности глутатионпероксидазы 50
2.3.5 Определение активности глутатион-S-трансферазы 51
2.3.6 Определение активности глутатионредуктазы 52
2.3.7 Определение содержания восстановленного глутатиона 52
2.3.8 Определение активности ксантиноксидоредуктазы 53
2.3.9 Определение активности ксантиноксидазы 54
2.3.10 Определение содержания мочевой кислоты 55
2.3.11 Определение общего белка 55
2.3.12 Иммуноферментный анализ 56
2.4 Генетические методы исследования 57
2.4.1 Выделение геномной ДНК 57
2.4.2 Проведение полимеразной цепной реакции 57
2.4.3 Детекция продуктов амплификации 59
2.5 Статистическая обработка результатов 60
Глава 3 Результаты исследования и обсуждение 62
3.1 Активность антиоксидантных ферментов в крови и синовиальной жидкости пациентов с первичным и посттравматическим гонартрозом 62
3.2 Активность ксантиноксидоредуктазы, ксантиноксидазы и содержание мочесвой кислоты в крови и синовиальной жидкости пациентов с первичным и посттравматическим гонартрозом 79
3.3 Уровень апоптоза лимфоцитов периферической крови при гонартрозе 84
3.4 Содержание провоспалительных цитокинов в крови и синовиальной жидкости пациентов с первичным/посттравматическим гонартрозом. Стратификация пациентов с ПТГА и здоровых лиц по генотипу полиморфных локусов Т-31СIL-ІД G-308A TNFa 86
3.5 Анализ ассоциации полиморфных локусов генов интерлейкинов, матриксных металлопротеиназ, NO-синтаз и антиоксидантных ферментов с посттравматическим гонартрозом 3.5.1 Распределение частот генотипов и аллелей полиморфных локусов генов провоспалительных цитокинов IL-ip, TNFa у пациентов с ПТГА и здоровых лиц. Анализ ассоциации содержания IL-ip/TNFa с генотипом T-31C IL-lp/ G-308A гена TNFa 92
3.5.2 Распределение частот генотипов и аллелей полиморфных локусов генов матриксных металлопротеиназ ММР-1 и ММР-12 и тканевого ингибитора металлопротеиназ TIMP-1 у пациентов с ПТГА и здоровых лиц 97
3.5.3 Распределение частот генотипов и аллелей полиморфных локусов генов NO-синтаз (nNOS, eNOS3) у пациентов с ПТГА и здоровых лиц. Анализ ассоциации уровня маркеров нитрозильного стресса и полиморфных локусов генов NO-синтаз 103
3.5.4 Распределение частот генотипов и аллелей полиморфных локусов генов генов антиоксидантных ферментов SOD1, SOD2, CAT, GSTP1 у пациентов с ПТГА и здоровых лиц. Анализ ассоциации активности ферментов супероксиддисмутазы, каталазы, глутатион-Б-трансферазы и полиморфных локусов генов SOD1, SOD2, С А Т, GSTP1 106
3.5.5 Моделирование межгенных взаимодействий методом редукции многофакторной размерности (MDR) 111
Заключение 116
Выводы 123
Список литературы 1
