Введение
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Природные полисахариды хитин и хитозан: строение, физико-химические свойства 10
1.2. Области применения 12
1.3. Основные источники хитина и хитозана 14
1.3.1. Ракообразные (Crustacea) 14
1.3.2. Грибы (Fungi) 17
1.3.3. Насекомые (Insecta) 19
1.3.4. Нетрадиционные источники 23
1.4. Получение хитина и хитозана из насекомых 24
1.5. Антимикробные пептиды насекомых 29
1.5.1. Перспективы применения антимикобных пептидов насекомых 32
1.5.2. «Липазная концепция» лечения туберкулеза 34
1.6. Антибактериальная активность хитозана 37
1.7. Липолитические ферменты 43
1.7.1. Области применения липолитических ферментов 48
2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ 56
2.1. Материалы и методы 56
3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ 68
3.1. Получение хитина и низкомолекулярного хитозана из кутикулы восковой моли Galleria mellonella L 68
3.1.1. Депротеинирование 68
3.1.2. Обесцвечивание 73
3.1.3. Деацетилирование 79
3.1.4. Ферментативный гидролиз 85
3.2. Изучение противотуберкулезных свойств хитозана 89
3.2.1. Подбор концентрации хитозана 90
3.2.2. Изучение зависимости гибели клеток М. smegmatis от Mr] хитозана 91
3.2.3. Изучение зависимости гибели клеток М. smegmatis от времени взаимодействия с хитозаном 92
3.2.4. Определение прочности связывания хитозана с
клетками М. smegmatis 93
3.2.5. Определение МИК хитозана 94
3.2.6. Изучение антибактериальных свойств производных хитозана 95
3.2.7. Противотуберкулезная активность хитозана 95
3.3. Изучение свойств экстракта выделенного из восковой моли Galleria mellonella 98
3.3.1. Изучение зависимости гибели клеток М. smegmatis от времени взаимодействия с экстрактом 98
3.3.2. Фракционирование экстракта выделенного из восковой моли 99
3.4. Изучение взаимодействия хитозана с липолитическими ферментами 103
3.4.1. Ингибирование активности липолитических ферментов хитозаном в гомогенных водных растворах 104
3.4.2. Ингибирование активности липолитических ферментов хитозаном в гетерогенных растворах, на границе раздела фаз 111
ВЫВОДЫ 116
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 117
ПРИЛОЖЕНИЕ 141
