Введение
Глава 1. Язвенная болезнь желудка и двенадцатиперстной кишки как дизрегуляционная патология организма 17
1.1.Ведущая роль иммунного дисбаланса в развитии и хронизации язв гастродуоденальной зоны 17
1.1.1.Нарушения гуморального и клеточного звена иммунной системы при язвенных поражениях слизистой оболочки гастродуоденальной зоны 17
1.1.2.Цитокиновые механизмы в иммунопатогенезе гастродуоденальных язв 22
1.1.3.Роль апоптоза в регуляции тканевого гомеостаза и патогенезе язвенной болезни 25
1.2.3начение аутоиммунных механизмов в патогенезе язвенной болезни 28
1.2.1. Аутоиммунные реакции и ульцерозный процесс 29
1.2.2. Связь аутоиммунных реакций с нарушениями микроциркуляции в слизистой оболочке желудка 34
1.3. Регуляторные пептиды в комплексном лечении язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки 37
1.4 Возможности применения клеток костного мозга для лечения длительно незаживающих, трудно рубцующихся язв желудка и двенадцатиперстной кишки 42
1.4.1. Факторы регуляции, выделяемые клетками костного мозга для индукции восстановительных процессов в поврежденных органах 44
1.4.2. Мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки костного мозга - как биорезерв тканевой регенерации 53
Глава 2. Материалы и методы исследования 62
2.1. Общая характеристика экспериментального и клинического материала..62
2.2. Технология получения и ведения культур клеток костного мозга 69
2.2.1. Технология получения, культивирования и подготовки для трансплантации мононуклеарной фракции клеток костного мозга 69
2.2.2. Технология получения, культивирования и подготовки для трансплантации мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток костного мозга 70
2.3. Технология моделирования длительно незаживающей аутоиммунной язвы желудка у крыс 71
2.3.1. Подготовка животных к забору материала и приготовление водно-солевого антигена для моделирования длительно незаживающих аутоиммунных язв желудка; Подготовка животных к моделированию ДНЯЖ и анестезиологическое обеспечение 71
2.3.2. Техника моделирования длительно незаживающей аутоиммунной язвы желудка 71
2.4. Техника трансплантации клеток в зону язвы желудка 73
2.5. Методы исследования 73
2.5.1. Методы культуральных исследований 73
2.5.2. Методы идентификации клеток после трансплантации в зону язвенного дефекта 75
2.6. Морфологические, биохимические и инструментальные методы исследования состояния зоны язвенного дефекта 80
2.6.1. Оценка регенерации язв 80
2.6.2. Оценка апоптоза эпителиальных клеток в слизистой оболочке желудка 81
2.6.3. Оценка системы «простагландины - циклические нуклеотиды» в слизистой оболочке желудка 82
2.6.4. Оценка состояния микроциркуляторного русла слизистой оболочки желудка 82
2.6.5. Электронно-микроскопическая оценка структурно-функциональных особенностей лимфоцитов в слизистой оболочке желудка больных с язвенной болезнью и животных с длительно незаживающими аутоиммунными язвами желудка 83
2.7. Исследования иммунного (цитокинового) статуса организма 84
2.7.1. Иммунологическое изучение слизистой оболочки желудка 84
2.7.2. Оценка морфофункционального состояния органов иммунной системы 84
2.7.3. Исследование цитокинового статуса в сыворотке крови 84
2.8. Статистическая обработка результатов 85
Глава 3. Прекулътивирование клеток костного мозга - как способ восстановления функциональной и биорегуляторной активности мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток аутологичного костного мозга 86
3.1. Фенотипическая характеристика мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток костного мозга крысы (определение однородности культуры ММСК), предназначенных для трансплантационного лечения язвенной болезни 86
3.2. Культивирование как способ восстановления функциональной активности клеток аутологичного костного мозга у животных с длительно незаживающими аутоиммунными язвами 87
Глава 4. Местные и системные патогенетические нарушения в организме при фрмировании длительно незаживающих аутоиммунных язв желудка 93
4.1. Патоморфология аутоиммунной язвы желудка 94
4.2. Апоптоз эпителиоцитов в слизистой оболочке желудка как индикатор хронического течения аутоиммунных язв желудка 95
4.3. Нарушения микроциркуляции при моделировании аутоиммунных язв желудка 98
4.4. Дисрегуляция системы «простагландины - циклические нуклеотиды» при язвообразовании 99
4.5. Цитокиновый дисбаланс как фактор развития и хронизации язвенной болезни 101
4.6. Морфофункциональное состояние органов иммуногенеза в процессе развития длительно незаживающей аутоиммунной язвы желудка 105
4.7. Цитотоксический эффект лимфоцитов в слизистой оболочке желудка при длительно незаживающей аутоиммунной язве желудка 107
4.8. Аутоиммунные факторы в патогенезе длительно незаживающих экспериментальных язв желудка 118
Глава 5. Влияние трансплантации культивированных клеток костного мозга на заживление длительно незаживающих аутоиммунных язв желудка 122
5.1. Влияние ММСК и МНК аутологичного КМ на динамику заживления язв и морфологическое состояние слизистой оболочки желудка 122
5.2. Влияние ММСК КМ на активность апоптоза эпителиоцитов в слизистой оболочке желудка в динамике лечения 133
5.3. Влияние ММСК КМ на систему «простагландины - циклические нуклеотиды» в регуляции процессов регенерации и цитопротекции в слизистой оболочке желудка 137
Глава 6. Влияние ммск и мнк км на коррекцию иммунного дисбаланса при длительно незаживающих аутоиммунных язвах желудка 141
6.1. Морфофункциональное состояние тимуса животных при длительно незаживающих аутоиммунных язвах желудка и трансплантации ММСК КМ 141
6.2. Морфофункциональное состояние селезенки животных при длительно незаживающих аутоиммунных язвах желудка при трансплантации ММСК КМ 144
6.3. Коррекция цитокинового дисбаланса при длительно незаживающих аутоиммунных язвах желудка и трансплантации ММСК КМ 149
6.4. Морфофункциональное состояние тимуса животных при длительно незаживающих язвах желудка и трансплантации МНК КМ 151
6.5. Морфофункциональное состояние селезенки животных при длительно незаживающих язвах желудка и трансплантации МНК КМ 154
6.6. Коррекция цитокинового дисбаланса при длительно незаживающих аутоиммунных язвах желудка и трансплантации МНК КМ
157
Глава 7. Влияние клеток костного мозга на стимуляцию неоангиогенеза и восстановление микроциркуляторного русла слизистой оболочки желудка 159
7.1. Динамика показателей микроциркуляции и ангиогенеза в слизистой оболочке желудка при длительно незаживающих аутоиммунных язвах желудка и трансплантации ММСК КМ 159
7.2. Динамика показателей микроциркуляции и ангиогенеза в слизистой оболочке желудка при длительно незаживающих аутоиммунных язвах желудка и трансплантации МНК КМ 164
Глава 8. Обсуждение полученных результатов 169
Заключение 205
Выводы 211
Практические рекомендации 214
Список литературы 216
