Введение
Список использованных сокращений 6
1. Введение 7
2. Обзор литературы 13
2.2.Проблема внутрибольничной и внутрикомнатной контаминации 20
2.3. Вирусные модели для изучения контаминации помещений
2.3.2. Вирус гепатита С (ВГС) 31
2.3.3. Вирус гепатита Е 34
2.3.4. Ротавирус 35
2.3.5. Аденовирус 39
2.3.6. Грипп 42
2.4. Молекулярные методы 46
2.4.1. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) 46
2.4.2. Иммуноферментный анализ (ИФА) 56
3.Материалы и методы 59
3.1. Материалы 59
3.1.1. Химические реагенты 59
3.1.2. Реагенты и наборы для молекулярной биологии 59
3.1.3. Ферменты 60
3.1.4. Вирусы 60
3.1.5. Праймеры 60
3.1.6. Оборудование 62
3.2. Методы 63
3.2.1. Отбор проб 63
3.2.1.1. Сбор образцов с поверхностей в поликлинике 63
3.2.1.2. Сбор образцов с поверхностей в аудиториях учебного
3.2.1.3. Сбор образцов с поверхностей в научно-исследовательских и научных лаборатиях 65
3.2.2. Выделение РНК и ДНК 65
3.2.3. Проведение ПНР 66
3.2.4. Анализ результатов ПНР 69
3.2.5. Исследование природы нуклеиновой кислоты в пробах 69
3.2.6. Пробоотбор аэрозолей 69
3.2.7. Отбор сывороток крови у сотрудников научных
3.2.7.1. Оценка наличия у здоровых контактных и неконтактных лиц антител на вирус гепатита Е (ВГЕ) 70
3.2.8. Оценка наличия у здоровых контактных и неконтактных лиц антител к вирусу гепатита С (ВГС) 71
3.2.9. Исследование образцов поверхностного микрослоя и аэрозоля прибрежного биогеоценоза 72
4. Результаты 74
4.1 Эксперименты in vitro для проверки потенциальной возможности нуклеиновых кислот вирусов служить в качестве биомаркеров для выявления вирусов на поверхности.
4.1.1. Выбор наиболее чувствительного набора ПЦР для обнаружения гепатита А и С 74
4.1.2 Эксперименты in vitro для проверки стабильности нуклеиновых кислот вирусов гепатита А, С и Е на поверхностях 76
4.2 Анализ аэрозолей и поверхностей учебного заведения на присутствие нуклеиновых кислот ротавирусов, аденовирусов и вируса гриппа А для оценки возможности выявления вирусов на поверхности, как маркера внутрикомнатной контаминации 77
4.2.1 .Анализ образцов аэрозолей в аудиториях учебного заведения на содержание ротавирусов, аденовирусов и вируса гриппа А 77
4.2.2. Анализ образцов с различных поверхностей в аудиториях учебного заведения на присутствие ротавирусов, деновирусов и вируса гриппа А.
4.3. Выявление нуклеиновых кислот вирусов гепатита А и С, ротавируса, аденовируса и вируса гриппа А на поверхности различных помещений в поликлинике, как маркеров вирусной контаминации внутрибольничных помещений 86
4.4. Анализ образцов различных поверхностей в научных и диагностических лабораториях на присутствие нуклеиновых кислот вирусов гриппа А и гепатита А, С и Е, ротавирусов и аденовирусов и оценка степени вирусной контаминации внутрилабораторных помещений 90
4.4.1. Анализ образцов различных поверхностей в научных и диагностических лабораториях на присутствие нуклеиновых кислот вирусов гриппа А и гепатита А, С
и Е, ротавирусов и аденовирусов 90
4.4.1.4. Лаборатория № 4
4.4.1.5. Лаборатория № 5.
помещении.
4.4.2. Анализ нуклеиновых кислот,
4.4.3. Количественный анализ нуклеиновых кислот обнаруженных в лабораториях №1 и №2 и оценка степени вирусной контаминации внутрилабораторных
4. 5 Анализ вероятности реализации вирусной инфекции контактным путем, по уровню антител к гепатиту С и Е, в сыворотке крови у сотрудников научных лабораторий и медицинских
4.5.1. Оценка наличия у здоровых контактных и неконтактных лиц антител к вирусу гепатита Е
(ВГЕ)
4.5.1. Оценка наличия у здоровых контактных и неконтактных лиц антител на вирус гепатита С
(ВГС)
4.6. Исследование образцов поверхностного микрослоя и аэрозоля прибрежного биогеоценоза на наличие РНК вируса гриппа А для изучения механизма
7. Библиография
