Введение
ГЛАВА I. Обзор литературы 12
1.1. Структурная организация сократительного аппарата скелетных и гладких мышц 12
1.2. Сократительные белки 18
1.2.1. Актин 18
1.2.2. Миозин 22
1.3. Области связывания актина с миозином 27
1.4. Взаимодействие миозина и актина 28
1.5. Регуляция актин-миозинового взаимодействия 31
1.6. Структура и функции кальдесмона 34
1.6.1. Структура кальдесмона и его положение в тонком филаменте 34
1.6.2. Связывание с актином 39
1.6.3. Связывание с тропомиозином 42
1.6.4. Взаимодействие с комплексом актин-тропомиозин 43
1.6.5. Взаимодействие с миозином 45
ГЛАВА II. Материалы и методы 48
2.1. Получение глицеринизированных мышечных волокон 48
2.2. Приготовление "теневых" мышечных волокон 48
2.3. Модификация Ф-актина мышечных волокон флуоресцентным красителем ТРИТЦ-фаллоидином 49
2.4. Получение миозина 49
2.5. Получение S1 51
2.6. Получение кальдесмона и тропомиозина 52
2.7. Получение С-концевого 35 кДа фрагмента кальдесмона 53
2.8. Получение рекомбинантных фрагментов кальдесмона HI и Н2 54
2.9. Присоединение белков к Ф-актину мышечных волокон 54
2.10. ДСН-электрофорез в полиакриламидном геле 55
2.11. Измерение изометрического напряжения 57
2.12. Измерение параметров поляризованной флуоресценции 58
ГЛАВА III. Результат 62
3.1. Влияние кальдесмона и его С-концевого фрагмента с молекулярной массой 35 кДа на амплитуду напряжения, развиваемого глицеринизированным мышечным волокном 62
3.2. Влияние кальдесмона и его С-концевого фрагмента на параметры поляризованной флуоресценции модифицированного ТРИТЦ-фаллоидином актина глицеринизированного мышечного волокна в расслаблении и ригоре 65
3.3. Влияние С-концевых актин-связывающих рекомбинантных пептидов кальдесмона HI и Н2 на параметры поляризованной флуоресценции модифицированного ТРИТЦ-фаллоидином актина "теневого" мышечного волокна при присоединении головки миозина к комплексу Ф-актин-тропомиозин 70
ГЛАВА IV. Обсуждение 75
4.1. Влияние кальдесмона и его С-концевого фрагмента с молекулярной массой 35 кДа на взаимодействие миозина и актина 75
4.2. Влияние рекомбинантных пептидов кальдесмона HI и Н2 на взаимодействие миозина и актина 82
Выводы 87
Список работ, опубликованных
По теме диссертации 88
Список литературы
