Введение
Глава I. Обзор литературы 11
1.1 Тромбоциты и их роль в гемостазе 11
1.2 Адгезия тромбоцитов: важнейшие адгезионные гликопротеины, их строение и функции 16
1.2.1 Гликопротеин Ib 16
1.2.2 Интегрины 18
1.2.3 Р-селектин 21
1.2.4 Фокальные контакты 21
1.3 Вклад интегринов в фокальную адгезию 23
1.4 Цитоскелет тромбоцитов и его роль в адгезии и агрегации тромбоцитов 27
1.5 Прикрепление мембранных адгезионных белков к цитоскелету тромбоцитов и их связь с адгезией тромбоцитов 34
1.6 Субпопуляции активированных тромбоцитов 37
Задачи 39
Глава II. Результаты 40
2.1 Исследование прикрепления адгезионных мембранных гликопротеинов к цитоскелету тромбоцитов 40
2.2 Исследование белкового профиля тромбоцитов при их активации
2.3 Выявление механизма, ответственного за разрушение связи адгезионных мембранных гликопротеинов с цитоскелетомтромбоцита 49
2.4 Анализ кинетики потери целостности мембраны тромбоцита при экспозиции ФС 51
2.5 Изучение влияния ингибиторов кальпаина на статус интегрина апьр3
2.6 Исследование влияния ингибиторов кальпаина на деградацию ряда цитоскелетных белков, задействованных в прикреплении мембранных гликопротеинов к цитоскелету 55
2.7 Анализ последовательности событий, протекающих при активации тромбоцитов 56
2.8 Анализ разрушения прикрепления мембранных гликопротеинов при экспозиции ФС по поверхности клетки 58
2.9 Адгезия ФС-положительных тромбоцитов 60
Глава III. Обсуждение результатов 62
Заключение 71
Выводы 72
Глава IV. Материалы и методы 73
4.1 Реактивы, использованные в работе 73
4.2 Оборудование, использованное в работе 73
4.3 Получение отмытых от белков плазмы тромбоцитов 74
4.4 Активация тромбоцитов 74
4.5 Инкубация тромбоцитов с антителами
4.6 Проточная цитометрия 75
4.7 Сортировка тромбоцитов 75
4.8 Анализ разрушения прикрепления мембранных гликопротеитнов к цитоскелету тромбоцитов в субпопуляциях активированных тромбоцитов с помощью конфокальной микроскопии 76
4.9 Анализ сопротивляемости тромбоцитов, иммобилизованных на подложке, к воздействию потока 76
4.10 Анализ способности тромбоцитов прикрепляться в потоке 77
Список сокращений 79
Список литературы: 80
