Введение
ГЛАВА 1. Обзор литературы .14
1.1 Механизмы формирования различных цитогенетических повреждений, регистрируемых с помощью микроядерного теста 14
1.1.1 Механизмы формирования микроядер 14
1.1.2 Механизмы формирования нуклеоплазменных мостов 18
1.1.3 Механизмы формирования протрузий 21
1.2 Оценка уровня цитогенетических нарушений c помощью микроядерного теста в лимфоцитах периферической крови,культивируемой в условиях цитокинетического блока 22
1.2.1 Использование показателей частоты микроядер в лимфоцитах для характеристики генотоксической нагрузки на организм человека 24
1.2.2 Повышенный уровень цитогенетических нарушений, выявляемых с помощью микроядерного теста, как маркер риска развития онкологических заболеваний .27
1.3 Основные механизмы и ключевые ферменты репарации ДНК 28
1.3.1 Эксцизионная репарация оснований (ЭРО) .30
1.3.2 Эксцизионная репарация нуклеотидов (ЭРН) .34
1.3.3 Репарация двойных разрывов (DSBR) .37
1.3.4 Ассоциации полиморфизма генов репарации ДНК с биомаркерами генотоксического эффекта в условиях экспозиции мутагенными факторами .39
1.4 Проблема оценки генотоксического риска в когортах работников угольных шахт .46
1.4.1 Условия труда и факторы риска в угольных шахтах 48
1.4.2. Характеристика хронических легочных профессиональных патологий шахтеров 49
1.4.3 Генотоксические факторы производственной среды угледобывающих предприятий 52
1.4.4 Применение микроядерного теста в лимфоцитах периферической крови для оценки цитогенетических повреждений у работников угольных шахт .54
ГЛАВА 2. Материалы и методы 59
2.1 Материалы исследования .59
2.2 Методы цитогенетического анализа 62
2.3 Методы молекулярно-генетического анализа 66
2.4 Методы статистической обработки результатов исследования 70
ГЛАВА 3. Результаты и обсуждение .73
3.1 Изучение цитогенетических нарушений и показателей пролиферации в лимфоцитах работников угледобывающих предприятий и в контроле... 73
3.1.1 Частота и спектр цитогенетических повреждений... 73
3.1.2 Показатели пролиферативной активности лимфоцитов и частота клеток на стадиях митоза и апоптоза .78
3.1.3 Влияние возраста, стажа работы, статуса и интенсивности курения, профессиональной специализации и наличия хронических заболеваний легких на частоту и спектр цитогенетических нарушений и показатели пролиферативной активности лимфоцитов у шахтеров .81
3.2 Анализ частот аллелей и генотипов полиморфных локусов генов репарации ДНК XRCC1 (rs25487), hOGG1 (rs1052133), ADPRT (rs1136410), XpD (rs13181), XpG (rs17655), XRCC4 (rs1805377, rs6869366, rs2075686), Lig4 (rs1805388), ATM (rs1801673) и NBS1 (rs1805794) 96
3.3 Оценка ассоциации цитогенетических повреждений и показателей пролиферации с полиморфными вариантами генов репарации ДНК 103
3.4 Анализ межгенных взаимодействий полиморфных локусов генов ферментов репарации ДНК, определяющих формирование повышенного уровня цитогенетических повреждений у шахтеров .118
Заключение 123
Выводы 128
Список литературы .
