Введение
QГЛАВА 1. Гипогликемические препараты с инкретиновой активностью и сосудистые осложнения сахарного диабета. Место агонистов рецептора GPR119 в терапии сахарного диабета и профилактике осложнений 13
1.1 Сосудистые осложнения сахарного диабета 13
1.1.2. Особенности течения ишемии головного мозга при сахарном диабете 14
1.2. Терапия ишемического инсульта. 15
1.2.1. Профилактика и лечение ишемического инсульта у пациентов с сахарным диабетом . 16
1.3. Система инкретинов, регуляция углеводного обмена и метаболические эффекты 18
1.3.1. Плейотропные свойства средств с инкретиновой активностью 20
1.3.2. Точки приложения действия инкретиномиметиков при нейродегенеративных и ишемических поражениях головного мозга 24
1.4. Сенсоры жирных кислот и метаболизм глюкозы 32
1.4.1. Рецептор GPR119. Строение. Функции. Механизм активации 33
1.4.2. Агонисты рецептора GPR119, как новая группа сахароснижающих средств 34
1.4.3. Перспективы использования агонистов рецептора GPR119 в качестве церебропротекторов при нарушениях мозгового кровообращения на фоне сахарного диабета 35
ГЛАВА 2. Материалы и методы 38
2.1. Экспериментальные животные 38
2.2. Исследуемое соединение и препараты сравнения 39
2.3. Дизайн исследования 40
2.3.1. Исследование церебропротекторного потенциала ZB-16 в разных дозах при моделировании окклюзии общих сонных артерий у интактных животных 42
2.3.2. Исследование церебропротекторного действия ZB-16 при моделировании фокальной ишемии ГМ на фоне сахарного диабета 43
2.3.3. Исследование механизмов церебропротекторного действия соединения ZB-16 45
2.4. Моделирование стрептозотоцин-никотинамид-индуцированного сахарного диабета 46
2.4.1. Оценка гипогликемической активности исследуемых соединений 47
2.4.2. Определение уровня инсулина и ГПП-1 в сыворотке крови методом твердофазного иммуноферментного анализа 47
2.5. Моделирование ишемического повреждения головного мозга 48
2.5.1. Выполнение необратимой двусторонней перевязки общих сонных артерий 48
2.5.2. Выполнение процедуры временной окклюзии средней мозговой артерии по методу J. Koizumi 49
2.6. Оценка степени психоневрологического дефицита 52
2.6.1.Оценка неврологического дефицита по шкале McGraw 52
2.6.2. Оценка неврологического дефицита по шкале Garcia 53
2.6.3. Оценка неврологического дефицита по шкале Combs и D Alecy 54
2.6.4. Оценка нарушений координации движений в тесте «Ротарод» 54
2.6.5. Оценка двигательной и ориентировочно-исследовательской активности в тесте «Открытое поле» 55
2.6.6. Оценка когнитивного дефицита в тестах ТЭИ и УРПИ 55
2.7. Изучение параметров тромбоцитарного и коагуляционного компонента гемостаза 57
2.7.1. Изучение параметров коагуляционного компонента гемостаза 57
2.7.2. Исследование тромбоцитарного компонента гемостаза 57
2.8. Оценка эндотелийзависимой вазодилатации 58
2.9 Определение концентрации ТБК-активных продуктов в плазме 58
2.10. Оценка кислотной резистентности эритроцитов 59
2.11. Статистическая обработка результатов исследования 59
ГЛАВА 3. Изучение церебропротекторного потенциала ZB-16 в разных дозах при моделировании окклюзии общих сонных артерий у интактных животных 60
3.1. Оценка летальности после ООСА 60
3.2. Оценка неврологического дефицита по шкале McGraw 61
3.3. Оценка нарушений координации движений в тесте «Ротарод» 62
3.4. Оценка двигательной и ориентировочно-исследовательской активности в тесте «Открытое поле» 64
3.5. Оценка когнитивного дефицита в тестах ТЭИ и УРПИ 65
Заключение 66
ГЛАВА 4. Исследование влияния лечебно-профилактического введения агониста рецептора GPR119 и препаратов сравнения на течениеишемического процесса при окклюзии средней мозговой артерии на фоне сахарного диабета . 68
4.1. Выбор продолжительности окклюзии СМА для использования в качестве модели фокальной ишемии у животных с СД 69
4.2. Оценка неврологического дефицита по шкале Garcia 71
4.3. Оценка неврологического дефицита по шкале Combs и D Alecy 73
4.4. Оценка нарушений координации движений в тесте «Ротарод» 75
4.5. Оценка двигательной и ориентировочно-исследовательской активности в тесте «Открытое поле» 76
4.6. Оценка когнитивного дефицита в тестах ТЭИ и УРПИ 79
4.7. Оценка объема инфаркта и степени отека ГМ у животных с фокальной ишемией на фоне сахарного диабета 80
4.8. Оценка содержания ТБК-активных продуктов у животных с фокальной ишемией ГМ на фоне сахарного диабета 82
4.9. Оценка кислотной резистентности эритроцитов у животных с фокальной ишемией ГМ на фоне сахарного диабета 83 Заключение 84
ГЛАВА 5. Определение механизмов церебропротекторного действия агониста рецептора GPR119– соединения ZB-16 86
5.1. Исследование противодиабетического действия агониста рецептора GPR119 – соединения ZB-16 у животных со стрептозотоцин никотинамид-индуцированным СД. 86
5.1.1. Исследование гипогликемической активности ZB-16 при курсовом введении в разных дозах 87
5.1.2. Изучение влияния соединения ZB-16 на уровень ГПП-1, инсулина и глюкозы в крови при глюкозной нагрузке 90
5.2. Исследование функционального состояния эндотелия и параметров гемостаза у животных со стрептозотоцин-никотинамид-индуцированным СД, получавших агонист рецептора GPR119 94
5.2.1.Исследование функционального состояния эндотелия у животных с экспериментальным СД, получавших агонист рецептораGPR119 95
5.2.2.Исследование параметров коагуляционного гемостаза у животных с экспериментальным СД, получавших агонист рецептора GPR119 97
5.2.3. Исследование параметров тромбоцитарного компонента гемостаза у животных с экспериментальным СД, получавших агонист рецептора GPR119 99
5.3. Исследование функционального состояния эндотелия и параметров гемостаза у животных с ишемией ГМ на фоне стрептозотоцин никотинамид-индуцированного СД, получавших агонист рецептора GPR119 100
5.3.1.Исследование функционального состояния эндотелия у животных с ишемией ГМ на фоне сахарного диабета, получавших агонист рецептора GPR119 101 5.3.2. Исследование параметров коагуляционного гемостаза у животных с ишемией ГМ на фоне сахарного диабета, получавших агонист рецептора GPR119 102
5.3.3.Исследование параметров тромбоцитарного компонента гемостаза у животных с ишемией ГМ на фоне сахарного диабета, получавших агонист рецептора GPR119 103
Заключение 104
ГЛАВА 6. Обсуждение результатов 108
Заключение 121
Выводы 122
Практические рекомендации 123
Перечень сокращений и условных обозначений 124
Список литературы 126
