Введение
ГЛАВА 1. Литературный обзор 11
1.1. Разнообразие и применение биосовместимых материалов 11
1.2. Свойства биосовместимых материалов
1.2.1. Основные биологические свойства 16
1.2.2. Основные физико-химические и механические свойства
1.3. Использование биосовместимых материалов для 3D культивирования 21
1.4. Использование поли(3-гидроксибутират) для 3D-культивирования клеток
1.4.1. Основные свойства поли(3-гидроксибутирата) 24
1.4.2. Биосинтез и внутриклеточная деградация поли(3-гидроксибутирата) 27
1.4.3. Области применения поли(3-гидроксибутирата)
1.5. 3D-культивирование клеток на матриксе, основанный на поли(3-гидроксибутирате) и его сополимеров 30
1.6. Культивирование мезенхимальных стволовых клеток мыши 32
1.7. Репликативное старение клеток в культуре 35
1.8. Области применения стволовых клеток в медицине
1.8.1. Получение стволовых клеток 37
1.8.2. Применение МСК в медицине: перспективы и проблемы 39
ГЛАВА 2. Материалы и методы 42
2.1. Материалы и оборудование 42
2.2. Объекты исследования 45
2.2.1. Мезенхимальные стволовые клетки мыши
2.2.2. Полимерный матрикс 47
2.3. Изготовление полимерных матриксов 52
2.4. Исследование морфологии и пористости матриксов 52
2.4.1. Исследование физико-термических свойств матриксов
методом дифференциальной сканирующей калориметрии 53
2.4.2. Исследование механических свойств полимерныхматриксов...53
2.4.5. Исследование гидрофильности полимерных матриксов 54
2.5. Культивирование МСК мыши на матриксе 54
2.5.1. Фенотипирование МСК мыши методом проточной цитометрии 55
2.5.2. Определение старых МСК мыши методом окрашивания на -галактозидазу 55
2.5.3. Направленная дифференцировка МСК мыши в остеоогенную и адипогенную дифференцировку 56
2.5.4. Проверка МСК мыши, культивируемых на матриксе, на иммортализацию 57
2.5.5. Микроскопия 57
ГЛАВА 3. Результаты исследования и их обсуждение 58
3.1. Исследование полигидроксибутирата 58
3.1.1. Получение полигидроксибутирата 58
3.1.2. Термо-физические характеристики полигидроксибутирата 60
3.2. Сравнение параметров роста МСК мыши на матриксе и пластике 62
3.2.1. Характеризация поверхностного фенотипа и направленная дифференцировка МСК 62
3.2.2. Изучение скорости пролиферации МСК мыши на матриксе из ПГБ и культуральном пластике 65
3.3. Сканирующая электронная и конфокальная микроскопия 71
3.4. Влияние матрикса из ПГБ на размеры клеток 76
3.5. Влияние матрикса из ПГБ на старение клеток 80
3.6. Проверка МСК на иммортализацию 84
Заключение 86
Выводы .88
Список сокращений 90
Cписок литературы
